SiHa

As células SiHa são uma linhagem celular de carcinoma espinocelular cervical humano amplamente utilizada em pesquisas há várias décadas. Elas foram isoladas de fragmentos de biópsia uterina primária de uma paciente japonesa de 55 anos com carcinoma espinocelular. Essa linhagem celular é de grande interesse para pesquisadores que estudam o câncer cervical e outras doenças relacionadas, devido às suas características genéticas únicas.

Verificou-se que as células SiHa expressam os genes p53+ e pRB+, que estão envolvidos na regulação do ciclo celular, no reparo do DNA e na supressão tumoral. Esses genes tornam as células SiHa um modelo ideal para o estudo dos mecanismos moleculares do desenvolvimento e da progressão do câncer. Além disso, as células SiHa são um hospedeiro adequado para transfecção, o que as torna uma excelente ferramenta para estudos de expressão gênica.

As células SiHa apresentam um cariótipo hipertriploide, com um número médio de cromossomos entre 69 e 72. As células SiHa são positivas para o HPV-16, apresentando integração de 1 a 2 cópias do genoma viral por célula. As células são tumorigênicas, formando carcinoma epidermoide pouco diferenciado (grau III) em camundongos nude. Isso as torna um excelente modelo para o estudo da progressão do câncer e para o teste de medicamentos anticâncer.

A linhagem celular SiHa expressa várias isoenzimas, incluindo AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 e PGM3. A microscopia eletrônica revelou tonofilamentos abundantes no citoplasma e desmossomos nas junções celulares. As células SiHa apresentam crescimento aderente, com tempo de duplicação de 17 horas em meio com 10% de FBS e de 21 horas em meio com 5% de FBS. A expressão da molécula de adesão celular epitelial (EpCAM) está presente em 92% das células SiHa, indicando sua origem epitelial. Elas apresentam forte expressão de citoqueratina, mas nenhuma expressão de vimentina.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.