SiHa

Las células SiHa son una línea celular de carcinoma escamoso de cuello uterino humano que se ha utilizado ampliamente en la investigación durante varias décadas. Se aislaron a partir de fragmentos de biopsia uterina primaria de una paciente japonesa de 55 años con carcinoma escamoso. Esta línea celular es de gran interés para los investigadores que estudian el cáncer de cuello uterino y otras enfermedades relacionadas debido a sus características genéticas únicas.

Se ha descubierto que las células SiHa expresan los genes p53+ y pRB+, los cuales participan en la regulación del ciclo celular, la reparación del ADN y la supresión tumoral. Estos genes convierten a las células SiHa en un modelo ideal para estudiar los mecanismos moleculares del desarrollo y la progresión del cáncer. Además, las células SiHa son un huésped adecuado para la transfección, lo que las convierte en una excelente herramienta para estudios de expresión génica.

Las células SiHa tienen un cariotipo hipertriploide, con un número promedio de cromosomas entre 69 y 72. Las células SiHa son positivas para el VPH-16, mostrando la integración de 1 a 2 copias del genoma viral por célula. Las células son tumorigénicas y forman un carcinoma epidermoide poco diferenciado (grado III) en ratones desnudos. Esto las convierte en un excelente modelo para estudiar la progresión del cáncer y probar fármacos anticancerosos.

La línea celular SiHa expresa diversas isoenzimas, entre ellas AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 y PGM3. La microscopía electrónica reveló abundantes tonofilamentos en el citoplasma y desmosomas en las uniones celulares. Las células SiHa son de crecimiento adherente, con un tiempo de duplicación de 17 horas en medio con 10 % de FBS y de 21 horas en medio con 5 % de FBS. La molécula de adhesión celular epitelial (EpCAM) se expresa en el 92 % de las células SiHa, lo que indica su origen epitelial. Muestran una fuerte expresión de citoqueratina, pero no de vimentina.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.