
- Weefsel
- Baarmoederhals
- Ziekte
- Humaan papillomavirus-gerelateerd cervicaal plaveiselcelcarcinoom
- Synoniemen
- Siha, SIHA
Documenten
SiHa
Cell line · Productnummer 305023
SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...
Maatwerk / Aanbevelingen
- SiHaCell line€430.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
SiHa cellen zijn een menselijke cervicaal plaveiselcelcarcinoom cellijn die al tientallen jaren veel gebruikt wordt in onderzoek. Ze werden geïsoleerd uit primaire uterusbiopsiefragmenten van een 55-jarige vrouwelijke Japanse patiënt met plaveiselcelcarcinoom. Deze cellijn is van groot belang voor onderzoekers die baarmoederhalskanker en andere gerelateerde ziekten bestuderen vanwege hun unieke genetische eigenschappen.
Van SiHa cellen is ontdekt dat ze de p53+ en pRB+ genen tot expressie brengen, die betrokken zijn bij celcyclusregulatie, DNA-herstel en tumorsuppressie. Deze genen maken SiHa cellen tot een ideaal model voor het bestuderen van de moleculaire mechanismen van kankerontwikkeling en -progressie. Daarnaast zijn SiHa cellen een geschikte gastheer voor transfectie, waardoor ze een uitstekend hulpmiddel zijn voor genexpressiestudies.
SiHa cellen hebben een hypertriploïd karyotype, met een gemiddeld chromosoomnummer tussen 69 en 72. De SiHa cellen zijn HPV-gevoelig. De SiHa cellen zijn HPV-16 positief en vertonen integratie van 1 tot 2 kopieën van het virale genoom per cel. De cellen zijn tumorigeen en vormen slecht gedifferentieerd epidermoïd carcinoom (graad III) in naakte muizen. Hierdoor zijn ze een uitstekend model voor het bestuderen van kankerprogressie en het testen van medicijnen tegen kanker.
De SiHa cellijn brengt verschillende iso-enzymen tot expressie, waaronder AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 en PGM3. Elektronenmicroscopie toonde overvloedige tonofilamenten in het cytoplasma en desmosomen bij de celovergangen. De groei-eigenschappen van SiHa cellen zijn adherent, met een verdubbelingstijd van 17 uur in 10% FBS media en 21 uur in 5% FBS media. Epitheliale cel adhesie molecuul (EpCAM) expressie is aanwezig in 92% van de SiHa cellen, wat duidt op hun epitheliale oorsprong. Ze vertonen een sterke cytokeratine-expressie maar geen vimentine-expressie.
- Weefsel
- Baarmoederhals
- Ziekte
- Humaan papillomavirus-gerelateerd cervicaal plaveiselcelcarcinoom
- Synoniemen
- Siha
- SIHA
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheel
- Tumorverwekkend
- Ja
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- SiHa (Cytion catalogusnummer 305023)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0032
05Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
07Donateur
- Leeftijd van de donor
- 55 jaar
- Etnische afkomst
- Aziatisch
08Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja