SiHa

SiHa-Zellen sind eine menschliche Zelllinie des Plattenepithelkarzinoms des Gebärmutterhalses, die seit mehreren Jahrzehnten in der Forschung verwendet wird. Sie wurden aus primären Gebärmutterbiopsie-Fragmenten einer 55-jährigen japanischen Patientin mit Plattenepithelkarzinom isoliert. Diese Zelllinie ist aufgrund ihrer einzigartigen genetischen Merkmale von großem Interesse für Forscher, die Gebärmutterhalskrebs und andere verwandte Krankheiten untersuchen.

Es wurde festgestellt, dass SiHa-Zellen die Gene p53+ und pRB+ exprimieren, die an der Regulierung des Zellzyklus, der DNA-Reparatur und der Tumorsuppression beteiligt sind. Diese Gene machen SiHa-Zellen zu einem idealen Modell für die Untersuchung der molekularen Mechanismen der Krebsentwicklung und -progression. Darüber hinaus sind SiHa-Zellen ein geeigneter Transfektionswirt, was sie zu einem hervorragenden Werkzeug für Genexpressionsstudien macht.

SiHa-Zellen haben einen hypertriploiden Karyotyp, mit einer durchschnittlichen Chromosomenzahl zwischen 69 und 72. Die SiHa-Zellen sind HPV-16-positiv und zeigen eine Integration von 1 bis 2 Kopien des viralen Genoms pro Zelle. Die Zellen sind tumorerzeugend und bilden in Nacktmäusen schwach differenzierte Epidermoidkarzinome (Grad III). Dies macht sie zu einem ausgezeichneten Modell für die Untersuchung des Krebsgeschehens und die Erprobung von Krebsmedikamenten.

Die SiHa-Zelllinie exprimiert verschiedene Isoenzyme, darunter AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 und PGM3. Die Elektronenmikroskopie zeigte reichlich Tonofilamente im Zytoplasma und Desmosomen an den Zellübergängen. Die Wachstumseigenschaften der SiHa-Zellen sind adhärent, mit einer Verdopplungszeit von 17 Stunden in 10% FBS-Medien und 21 Stunden in 5% FBS-Medien. 92 % der SiHa-Zellen weisen eine Expression des Epithelzelladhäsionsmoleküls (EpCAM) auf, was auf ihren epithelialen Ursprung hinweist. Sie weisen eine starke Zytokeratin-Expression, aber keine Vimentin-Expression auf.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung