Премини към съдържанието
SiHa
Тъкан
Цервикс
Заболяване
Свързан с човешкия папиломен вирус плоскоклетъчен карцином на маточната шийка
Синоними
Siha, SIHA

Документи

SiHa

Cell line · Номер на продукта 305023

SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките SiHa са клетъчна линия за плоскоклетъчен карцином на шийката на матката, която се използва широко в научните изследвания от няколко десетилетия. Те са изолирани от фрагменти от първична биопсия на матката от 55-годишна японска пациентка с плоскоклетъчен карцином. Тази клетъчна линия представлява голям интерес за изследователите, изучаващи рака на маточната шийка и други свързани с него заболявания, поради уникалните си генетични характеристики.

Установено е, че SiHa клетките експресират гените p53+ и pRB+, които участват в регулирането на клетъчния цикъл, възстановяването на ДНК и потискането на тумора. Тези гени превръщат клетките SiHa в идеален модел за изучаване на молекулярните механизми на развитието и прогресията на рака. Освен това SiHa клетките са подходящ гостоприемник за трансфекция, което ги прави отличен инструмент за изследвания на генната експресия.

SiHa клетките имат хипертриплоиден кариотип със среден брой хромозоми между 69 и 72. Клетките SiHa са HPV-16 положителни, като показват интегриране на 1 до 2 копия на вирусния геном на клетка. Клетките са туморогенни, като образуват слабо диференциран епидермоиден карцином (степен III) в голи мишки. Това ги прави отличен модел за изучаване на прогресията на рака и тестване на противоракови лекарства.

Клетъчната линия SiHa експресира различни изоензими, включително AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 и PGM3. Електронната микроскопия разкрива изобилие от тонофиламенти в цитоплазмата и дезмозоми на клетъчните връзки. Клетките SiHa са адхезивни, като времето за удвояване е 17 часа в среда с 10 % FBS и 21 часа в среда с 5 % FBS. Експресията на молекулата на епителната клетъчна адхезия (EpCAM) е налице в 92 % от клетките SiHa, което показва техния епителен произход. Те показват силна експресия на цитокератин, но не и на виментин.

Тъкан
Цервикс
Заболяване
Свързан с човешкия папиломен вирус плоскоклетъчен карцином на маточната шийка
Синоними
  • Siha
  • SIHA

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Туморогенен
Да

04Идентификатори

Източник
SiHa (каталожен номер на Cytion 305023)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0032

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
55 години
Етническа принадлежност
Азиатски