
- Audums
- Dzemdes kakls
- Slimība
- Ar cilvēka papilomas vīrusu saistīta dzemdes kakla plakanšūnu karcinoma
- Sinonīmi
- Siha, SIHA
Dokumenti
SiHa
Cell line · Preces numurs 305023
SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...
Pielāgošana / Ieteikumi
- SiHaCell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
SiHa šūnas ir cilvēka dzemdes kakla plakanšūnu karcinomas šūnu līnija, kas jau vairākus gadu desmitus tiek plaši izmantota pētniecībā. Tās tika izolētas no primārās dzemdes biopsijas fragmentiem no 55 gadus vecas japāņu pacientes ar plakanšūnu karcinomu. Šī šūnu līnija ir ļoti interesanta pētniekiem, kas pēta dzemdes kakla vēzi un citas ar to saistītas slimības, jo tai ir unikālas ģenētiskās īpašības.
Ir konstatēts, ka SiHa šūnas ekspresē p53+ un pRB+ gēnus, kas ir iesaistīti šūnu cikla regulēšanā, DNS labošanā un audzēja nomākšanā. Šie gēni padara SiHa šūnas par ideālu modeli vēža attīstības un progresēšanas molekulāro mehānismu izpētei. Turklāt SiHa šūnas ir piemērots transfekcijas saimnieks, padarot tās par lielisku instrumentu gēnu ekspresijas pētījumiem.
SiHa šūnām ir hipertriploīds kariotips ar vidējo hromosomu skaitu no 69 līdz 72 hromosomām. SiHa šūnas ir HPV-16 pozitīvas, un tajās ir integrētas 1 līdz 2 vīrusa genoma kopijas uz šūnu. Šūnas ir tumorigēnas, veidojot vāji diferencētu epidermoīdo karcinomu (III pakāpes) nude pelēm. Tas padara tās par lielisku modeli vēža progresēšanas izpētei un pretvēža zāļu testēšanai.
SiHa šūnu līnija ekspresē dažādus izoenzīmus, tostarp AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 un PGM3. Elektronmikroskopija atklāja bagātīgus tonofilamentus citoplazmā un desmosomas šūnu savienojumos. SiHa šūnu augšanas īpašības ir adherentas, un to dubultošanās laiks ir 17 stundas 10 % FBS barotnē un 21 stunda 5 % FBS barotnē. Epitēlija šūnu adhēzijas molekulas (EpCAM) ekspresija ir 92 % SiHa šūnu, kas norāda uz to epitēlija izcelsmi. Tām ir izteikta citokeratīna ekspresija, bet nav vimentīna ekspresijas.
- Audums
- Dzemdes kakls
- Slimība
- Ar cilvēka papilomas vīrusu saistīta dzemdes kakla plakanšūnu karcinoma
- Sinonīmi
- Siha
- SIHA
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlija
- Tumorogēns
- Jā
04Identifikatori
- Atsauce
- SiHa (Cytion kataloga numurs 305023)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0032
05Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
07Ziedotājs
- Donora vecums
- 55 gadi
- Etniskā piederība
- Āzijas
08Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā