SiHa

Les cellules SiHa constituent une lignée cellulaire issue d’un carcinome épidermoïde du col de l’utérus humain, largement utilisée dans la recherche depuis plusieurs décennies. Elles ont été isolées à partir de fragments de biopsie utérine primaire prélevés chez une patiente japonaise de 55 ans atteinte d’un carcinome épidermoïde. Cette lignée cellulaire présente un grand intérêt pour les chercheurs qui étudient le cancer du col de l’utérus et d’autres maladies connexes en raison de ses caractéristiques génétiques uniques.

On a constaté que les cellules SiHa expriment les gènes p53+ et pRB+, qui interviennent dans la régulation du cycle cellulaire, la réparation de l’ADN et la suppression tumorale. Ces gènes font des cellules SiHa un modèle idéal pour l’étude des mécanismes moléculaires du développement et de la progression du cancer. De plus, les cellules SiHa constituent un hôte de transfection approprié, ce qui en fait un excellent outil pour les études sur l’expression génique.

Les cellules SiHa présentent un caryotype hypertriploïde, avec un nombre moyen de chromosomes compris entre 69 et 72. Les cellules SiHa sont positives pour le VPH-16, présentant l’intégration de 1 à 2 copies du génome viral par cellule. Ces cellules sont tumorigènes et forment un carcinome épidermoïde peu différencié (grade III) chez la souris nue. Cela en fait un excellent modèle pour l’étude de la progression du cancer et l’évaluation des médicaments anticancéreux.

La lignée cellulaire SiHa exprime diverses isoenzymes, notamment AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 et PGM3. La microscopie électronique a révélé la présence abondante de tonofilaments dans le cytoplasme et de desmosomes au niveau des jonctions cellulaires. Les cellules SiHa présentent un comportement de croissance adhérent, avec un temps de doublement de 17 heures dans un milieu contenant 10 % de FBS et de 21 heures dans un milieu contenant 5 % de FBS. L’expression de la molécule d’adhésion cellulaire épithéliale (EpCAM) est présente dans 92 % des cellules SiHa, ce qui indique leur origine épithéliale. Elles présentent une forte expression de la cytokératine, mais aucune expression de la vimentine.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.