SiHa

Las células SiHa son una línea celular humana de carcinoma de células escamosas de cuello uterino ampliamente utilizada en investigación desde hace varias décadas. Se aislaron a partir de fragmentos de biopsia uterina primaria de una paciente japonesa de 55 años con carcinoma de células escamosas. Esta línea celular es de gran interés para los investigadores que estudian el cáncer de cuello de útero y otras enfermedades relacionadas debido a sus características genéticas únicas.

Se ha descubierto que las células SiHa expresan los genes p53+ y pRB+, que intervienen en la regulación del ciclo celular, la reparación del ADN y la supresión de tumores. Estos genes hacen de las células SiHa un modelo ideal para estudiar los mecanismos moleculares del desarrollo y la progresión del cáncer. Además, las células SiHa son un huésped de transfección adecuado, lo que las convierte en una herramienta excelente para los estudios de expresión génica.

Las células SiHa tienen un cariotipo hipertriploide, con un número cromosómico medio entre 69 y 72. Las células SiHa son positivas al VPH-16, mostrando una integración de 1 a 2 copias del genoma viral por célula. Las células son tumorigénicas, formando carcinoma epidermoide poco diferenciado (grado III) en ratones desnudos. Esto las convierte en un modelo excelente para estudiar la progresión del cáncer y probar fármacos anticancerígenos.

La línea celular SiHa expresa varias isoenzimas, como AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 y PGM3. La microscopía electrónica reveló abundantes tonofilamentos en el citoplasma y desmosomas en las uniones celulares. Las propiedades de crecimiento de las células SiHa son adherentes, con un tiempo de duplicación de 17 horas en medio FBS al 10% y de 21 horas en medio FBS al 5%. La expresión de la molécula de adhesión celular epitelial (EpCAM) está presente en el 92% de las células SiHa, lo que indica su origen epitelial. Muestran una fuerte expresión de citoqueratina pero no de vimentina.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía