
- Kude
- Emakakael
- Haigus
- Inimese papilloomiviirusega seotud emakakaela lamerakk-kartsinoom
- Sünonüümid
- Siha, SIHA
Dokumendid
SiHa
Cell line · Toote number 305023
SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...
Kohandamine / Soovitused
- SiHaCell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
SiHa rakud on inimese emakakaelavähi rakuliin, mida on teadusuuringutes laialdaselt kasutatud juba mitu aastakümmet. Need isoleeriti emaka primaarsetest biopsiafragmentidest, mis saadi 55-aastase Jaapani naissoost plaatinakartsinoomiga patsiendilt. See rakuliin pakub suurt huvi emakakaelavähki ja teisi sellega seotud haigusi uurivatele teadlastele nende ainulaadsete geneetiliste omaduste tõttu.
On leitud, et SiHa rakud ekspresseerivad p53+ ja pRB+ geene, mis osalevad rakutsükli reguleerimises, DNA parandamises ja kasvajate pärssimises. Need geenid muudavad SiHa rakud ideaalseks mudeliks vähi arengu ja progresseerumise molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. Lisaks sellele on SiHa rakud sobivad transfektsiooni peremeheks, mis teeb neist suurepärase vahendi geeniekspressiooni uuringuteks.
SiHa rakkudel on hüpertriploidne karüotüüp, mille keskmine kromosoomide arv jääb vahemikku 69-72. SiHa rakud on HPV-16-positiivsed, näidates 1 kuni 2 koopiat viiruse genoomi integreerimist raku kohta. Rakud on kasvajalised, moodustades alasti hiirtel halvasti diferentseerunud epidermoidkartsinoomi (III aste). See teeb neist suurepärase mudeli vähi progresseerumise uurimiseks ja vähivastaste ravimite testimiseks.
SiHa rakuliin ekspresseerib erinevaid isoensüüme, sealhulgas AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ja PGM3. Elektroonmikroskoopia näitas rohkesti toonofilamente tsütoplasmas ja desmosomeid rakkude liitekohtades. SiHa rakkude kasvuomadused on adherentsed, kahekordistumisajaga 17 tundi 10% FBS-keskkonnas ja 21 tundi 5% FBS-keskkonnas. Epiteelraku adhesioonimolekuli (EpCAM) ekspressioon on olemas 92%-l SiHa rakkudest, mis viitab nende epiteeli päritolule. Neil on tugev tsütokeratiini ekspressioon, kuid vimentiini ekspressioon puudub.
- Kude
- Emakakael
- Haigus
- Inimese papilloomiviirusega seotud emakakaela lamerakk-kartsinoom
- Sünonüümid
- Siha
- SIHA
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteel
- Tuumorigeenne
- Jah
04Tunnused
- Viide
- SiHa (Cytioni katalooginumber 305023)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0032
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Doonori vanus
- 55 aastat
- Etniline kuuluvus
- Aasia
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah