SiHa

SiHa-celler er en cellelinje fra humant cervikalt pladecellekarcinom, som har været meget anvendt i forskning i flere årtier. De blev isoleret fra primære livmoderbiopsifragmenter fra en 55-årig kvindelig japansk patient med pladecellekarcinom. Denne cellelinje er af stor interesse for forskere, der studerer livmoderhalskræft og andre relaterede sygdomme på grund af deres unikke genetiske egenskaber.

Det har vist sig, at SiHa-celler udtrykker generne p53+ og pRB+, som er involveret i regulering af cellecyklus, DNA-reparation og tumorundertrykkelse. Disse gener gør SiHa-celler til en ideel model til undersøgelse af de molekylære mekanismer i kræftudvikling og -progression. Derudover er SiHa-celler en passende transfektionsvært, hvilket gør dem til et fremragende værktøj til genekspressionsstudier.

SiHa-celler har en hypertriploid karyotype med et gennemsnitligt kromosomtal på mellem 69 og 72. SiHa-cellerne er HPV-16-positive og viser integration af 1 til 2 kopier af det virale genom pr. celle. Cellerne er tumorigeniske og danner dårligt differentierede epidermoide karcinomer (grad III) i nøgne mus. Det gør dem til en fremragende model til at studere kræftprogression og teste kræftmedicin.

SiHa-cellelinjen udtrykker forskellige isoenzymer, herunder AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 og PGM3. Elektronmikroskopi afslørede rigelige tonofilamenter i cytoplasmaet og desmosomer ved celleovergangene. SiHa-cellernes vækstegenskaber er adhærente med en fordoblingstid på 17 timer i 10% FBS-medier og 21 timer i 5% FBS-medier. Epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) er til stede i 92% af SiHa-cellerne, hvilket indikerer deres epitheliale oprindelse. De viser stærk cytokeratin-ekspression, men ingen vimentin-ekspression.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring