
- Audinys
- Gimdos kaklelis
- Liga
- Su žmogaus papilomos virusu susijusi gimdos kaklelio plokščialąstelinė karcinoma
- Sinonimai
- Siha, SIHA
Dokumentai
SiHa
Cell line · Prekės numeris 305023
SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- SiHaCell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
SiHa ląstelės yra žmogaus gimdos kaklelio plokščialąstelinės karcinomos ląstelių linija, kuri jau kelis dešimtmečius plačiai naudojama moksliniams tyrimams. Jos buvo išskirtos iš pirminių gimdos biopsijos fragmentų, gautų iš 55 metų japonės pacientės, sergančios plokščialąsteline karcinoma. Ši ląstelių linija dėl savo unikalių genetinių savybių yra labai svarbi mokslininkams, tiriantiems gimdos kaklelio vėžį ir kitas susijusias ligas.
Nustatyta, kad SiHa ląstelės ekspresuoja p53+ ir pRB+ genus, kurie dalyvauja ląstelės ciklo reguliavime, DNR taisyme ir naviko slopinime. Dėl šių genų SiHa ląstelės yra idealus modelis vėžio vystymosi ir progresavimo molekuliniams mechanizmams tirti. Be to, SiHa ląstelės yra tinkamas transfekcijos šeimininkas, todėl jos yra puiki priemonė genų raiškos tyrimams.
SiHa ląstelės turi hipertriploidinį kariotipą, vidutinis chromosomų skaičius yra 69-72. SiHa ląstelės yra teigiamos ŽPV-16 viruso atžvilgiu, o kiekvienoje ląstelėje yra 1-2 viruso genomo kopijos. Ląstelės yra tumorigeninės, nude pelių organizme formuoja blogai diferencijuotą epidermoidinę karcinomą (III laipsnio). Dėl to jos yra puikus modelis vėžio progresavimui tirti ir vaistams nuo vėžio išbandyti.
SiHa ląstelių linija ekspresuoja įvairius izofermentus, įskaitant AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ir PGM3. Elektroninės mikroskopijos metu nustatyta, kad citoplazmoje gausu tonofilamentų, o ląstelių jungtyse - desmosomų. SiHa ląstelės auga adherentiškai, jų augimo trukmė padvigubėja per 17 valandų 10 % FBS terpėje ir per 21 valandą 5 % FBS terpėje. Epitelinių ląstelių adhezijos molekulių (EpCAM) raišką turi 92 % SiHa ląstelių, o tai rodo, kad jos yra epitelinės kilmės. Joms būdinga stipri citokeratino raiška, tačiau nėra vimentino raiškos.
- Audinys
- Gimdos kaklelis
- Liga
- Su žmogaus papilomos virusu susijusi gimdos kaklelio plokščialąstelinė karcinoma
- Sinonimai
- Siha
- SIHA
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Epitelis
- Tumorogeninis
- Taip
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- SiHa (Cytion katalogo numeris 305023)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0032
05Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
07Donoras
- Donoro amžius
- 55 metai
- Etninė priklausomybė
- Azijos
08Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip