SiHa

SiHa-solut ovat ihmisen kohdunkaulan levyepiteelisolusyöpäsolulinja, jota on käytetty laajalti tutkimuksessa useiden vuosikymmenien ajan. Ne eristettiin primaarisista kohdun koepaloista, jotka saatiin 55-vuotiaalta japanilaiselta naispotilaalta, jolla oli levyepiteelisolusyöpä. Tämä solulinja on erittäin kiinnostava kohdunkaulan syöpää ja muita siihen liittyviä sairauksia tutkiville tutkijoille niiden ainutlaatuisten geneettisten ominaisuuksien vuoksi.

SiHa-solujen on todettu ilmentävän p53+- ja pRB+-geenejä, jotka osallistuvat solusyklin säätelyyn, DNA:n korjaamiseen ja kasvainten tukahduttamiseen. Nämä geenit tekevät SiHa-soluista ihanteellisen mallin syövän kehittymisen ja etenemisen molekyylimekanismien tutkimiseen. Lisäksi SiHa-solut ovat sopivia transfektio-isäntiä, mikä tekee niistä erinomaisen välineen geeniekspressiotutkimuksiin.

SiHa-soluilla on hypertriploidinen karyotyyppi, ja niiden keskimääräinen kromosomimäärä on 69-72 kromosomia. SiHa-solut ovat HPV-16-positiivisia, ja niissä on integroitunut 1-2 kopiota virusgenomia solua kohti. Solut ovat tumorigeenisiä, ja ne muodostavat huonosti erilaistunutta epidermoidista karsinoomaa (aste III) alasti elävissä hiirissä. Tämä tekee niistä erinomaisen mallin syövän etenemisen tutkimiseen ja syöpälääkkeiden testaamiseen.

SiHa-solulinja ilmentää erilaisia isoentsyymejä, kuten AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ja PGM3. Elektronimikroskooppi paljasti runsaasti tonofilamentteja sytoplasmassa ja desmosomeja soluliitoksissa. SiHa-solujen kasvuominaisuudet ovat adherenttejä, ja niiden kaksinkertaistumisaika on 17 tuntia 10 %:n FBS-mediassa ja 21 tuntia 5 %:n FBS-mediassa. Epiteelisolujen adheesiomolekyylin (EpCAM) ilmentymistä esiintyy 92 prosentissa SiHa-soluista, mikä viittaa niiden epiteeliperäisyyteen. Sytokeratiini ilmentyy voimakkaasti, mutta vimentiini ei ilmenty.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa