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SiHa
ティッシュ
子宮頸部
病気
ヒトパピローマウイルス関連子宮頸部扁平上皮癌
同義語
Siha, SIHA

SiHa

Cell line · 製品番号 305023

SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...

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01概要

説明

SiHa細胞はヒト子宮頸部扁平上皮癌細胞株で、数十年にわたり研究に広く用いられてきた。この細胞株は、55歳の日本人女性扁平上皮癌患者の子宮生検片から単離された。この細胞株は、そのユニークな遺伝的特徴から、子宮頸がんやその他の関連疾患を研究する研究者にとって非常に興味深いものである。

SiHa細胞は、細胞周期制御、DNA修復、腫瘍抑制に関与するp53+遺伝子とpRB+遺伝子を発現していることが判明している。これらの遺伝子により、SiHa細胞は癌の発生と進行の分子メカニズムを研究する理想的なモデルとなっている。さらに、SiHa細胞はトランスフェクション宿主として適しており、遺伝子発現研究の優れたツールとなっている。

SiHa細胞は、平均染色体数が69から72の間の超3倍体の核型を持つ。SiHa細胞はHPV-16陽性で、細胞あたり1~2コピーのウイルスゲノムの集積を示す。細胞は腫瘍形成性があり、ヌードマウスで低分化表皮癌(グレードIII)を形成する。このため、癌の進行を研究したり、抗癌剤を試験したりするための優れたモデルとなっている。

SiHa細胞株は、AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、Me-2、PGM1、PGM3を含む様々なアイソザイムを発現している。電子顕微鏡では、細胞質に豊富なトノフィラメントと細胞接合部のデスモソームが観察された。SiHa細胞の増殖特性は接着性で、10%FBS培地では17時間、5%FBS培地では21時間の倍加時間を示した。上皮細胞接着分子(EpCAM)の発現はSiHa細胞の92%に認められ、上皮由来であることを示している。強いサイトケラチン発現を示すが、ビメンチン発現はない。

ティッシュ
子宮頸部
病気
ヒトパピローマウイルス関連子宮頸部扁平上皮癌
同義語
  • Siha
  • SIHA

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮
腫瘍形成性
はい

04識別子

引用
SiHa(Cytion カタログ番号 305023)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0032

05取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
55年
民族
アジア