SiHa

As células SiHa são uma linha celular de carcinoma de células escamosas do colo do útero humano que tem sido amplamente utilizada na investigação há várias décadas. Foram isoladas a partir de fragmentos de biopsia uterina primária de uma doente japonesa de 55 anos com carcinoma espinocelular. Esta linha celular é de grande interesse para os investigadores que estudam o cancro do colo do útero e outras doenças relacionadas, devido às suas caraterísticas genéticas únicas.

Verificou-se que as células SiHa expressam os genes p53+ e pRB+, que estão envolvidos na regulação do ciclo celular, na reparação do ADN e na supressão de tumores. Estes genes fazem das células SiHa um modelo ideal para estudar os mecanismos moleculares do desenvolvimento e progressão do cancro. Além disso, as células SiHa são um hospedeiro de transfecção adequado, o que as torna uma excelente ferramenta para estudos de expressão genética.

As células SiHa têm um cariótipo hipertriplóide, com um número médio de cromossomas entre 69 e 72. As células SiHa são positivas para o HPV-16, apresentando uma integração de 1 a 2 cópias do genoma viral por célula. As células são tumorigénicas, formando carcinoma epidermoide pouco diferenciado (grau III) em ratinhos nus. Isto torna-as um excelente modelo para o estudo da progressão do cancro e para o teste de medicamentos anticancerígenos.

A linha celular SiHa expressa várias isoenzimas, incluindo AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 e PGM3. A microscopia eletrónica revelou tonofilamentos abundantes no citoplasma e desmossomas nas junções celulares. As propriedades de crescimento das células SiHa são aderentes, com um tempo de duplicação de 17 horas em meio com 10% de FBS e 21 horas em meio com 5% de FBS. A expressão da molécula de adesão de células epiteliais (EpCAM) está presente em 92% das células SiHa, indicando a sua origem epitelial. Apresentam uma forte expressão de citoqueratina, mas não apresentam expressão de vimentina.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia