SiHa

SiHa-celler er en cellelinje fra humant livmorhalskreft med plateepitelkarsinom som har vært mye brukt i forskning i flere tiår. De ble isolert fra primære livmorbiopsifragmenter fra en 55 år gammel japansk kvinne med plateepitelkarsinom. Denne cellelinjen er av stor interesse for forskere som studerer livmorhalskreft og andre relaterte sykdommer på grunn av sine unike genetiske egenskaper.

Det har vist seg at SiHa-celler uttrykker p53+- og pRB+-genene, som er involvert i cellesyklusregulering, DNA-reparasjon og tumorundertrykkelse. Disse genene gjør SiHa-celler til en ideell modell for å studere de molekylære mekanismene bak kreftutvikling og -progresjon. I tillegg er SiHa-celler en egnet vert for transfeksjon, noe som gjør dem til et utmerket verktøy for genekspresjonsstudier.

SiHa-celler har en hypertriploid karyotype, med et gjennomsnittlig kromosomtall på mellom 69 og 72. SiHa-cellene er HPV-16-positive, og viser integrasjon av 1 til 2 kopier av virusgenomet per celle. Cellene er tumorogene og danner dårlig differensiert epidermoid karsinom (grad III) i nakne mus. Dette gjør dem til en utmerket modell for studier av kreftprogresjon og testing av legemidler mot kreft.

SiHa-cellelinjen uttrykker ulike isoenzymer, blant annet AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 og PGM3. Elektronmikroskopi avslørte rikelig med tonofilamenter i cytoplasmaet og desmosomer ved celleovergangene. Vekstegenskapene til SiHa-celler er adherente, med en fordoblingstid på 17 timer i 10 % FBS-medium og 21 timer i 5 % FBS-medium. Epitelcelleadhesjonsmolekyl (EpCAM) er til stede i 92 % av SiHa-cellene, noe som indikerer at de har epitelial opprinnelse. De viser sterkt cytokeratin-uttrykk, men ikke vimentin-uttrykk.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring