SiHa

Buňky SiHa jsou buněčnou linií lidského dlaždicobuněčného karcinomu děložního hrdla, která se již několik desetiletí široce používá ve výzkumu. Byly izolovány z fragmentů primární děložní biopsie 55leté japonské pacientky se spinocelulárním karcinomem. Tato buněčná linie je díky svým jedinečným genetickým vlastnostem velmi zajímavá pro výzkumné pracovníky studující rakovinu děložního čípku a další příbuzná onemocnění.

Bylo zjištěno, že buňky SiHa exprimují geny p53+ a pRB+, které se podílejí na regulaci buněčného cyklu, opravách DNA a potlačování nádorů. Díky těmto genům jsou buňky SiHa ideálním modelem pro studium molekulárních mechanismů vývoje a progrese rakoviny. Buňky SiHa jsou navíc vhodným hostitelem pro transfekci, což z nich činí vynikající nástroj pro studium genové exprese.

Buňky SiHa mají hypertriploidní karyotyp s průměrným počtem chromozomů mezi 69 a 72. Buňky SiHa jsou HPV-16 pozitivní a vykazují integraci 1 až 2 kopií virového genomu na buňku. Buňky jsou tumorigenní a vytvářejí špatně diferencovaný epidermoidní karcinom (stupeň III) u nahých myší. To z nich činí vynikající model pro studium progrese rakoviny a testování protinádorových léčiv.

Buněčná linie SiHa exprimuje různé izoenzymy, včetně AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 a PGM3. Elektronová mikroskopie odhalila hojná tonofilamenta v cytoplazmě a desmosomy na buněčných spojích. Růstové vlastnosti buněk SiHa jsou adherentní, s dobou zdvojení 17 hodin v médiu s 10 % FBS a 21 hodin v médiu s 5 % FBS. Exprese molekul adheze epiteliálních buněk (EpCAM) je přítomna u 92 % buněk SiHa, což svědčí o jejich epiteliálním původu. Vykazují silnou expresi cytokeratinu, ale žádnou expresi vimentinu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení