SiHa

Bunky SiHa sú bunkovou líniou ľudského skvamózneho karcinómu krčka maternice, ktorá sa vo výskume široko používa už niekoľko desaťročí. Boli izolované z fragmentov primárnej biopsie maternice od 55-ročnej japonskej pacientky so skvamocelulárnym karcinómom. Táto bunková línia je pre svoje jedinečné genetické vlastnosti veľmi zaujímavá pre výskumníkov skúmajúcich rakovinu krčka maternice a iné súvisiace ochorenia.

Zistilo sa, že bunky SiHa exprimujú gény p53+ a pRB+, ktoré sa podieľajú na regulácii bunkového cyklu, oprave DNA a potláčaní nádorov. Tieto gény robia z buniek SiHa ideálny model na štúdium molekulárnych mechanizmov vývoja a progresie rakoviny. Okrem toho sú bunky SiHa vhodným hostiteľom na transfekciu, čo z nich robí vynikajúci nástroj na štúdie expresie génov.

Bunky SiHa majú hypertriploidný karyotyp s priemerným počtom chromozómov 69 až 72. Bunky SiHa sú HPV-16 pozitívne a vykazujú integráciu 1 až 2 kópií vírusového genómu na bunku. Bunky sú tumorogénne a vytvárajú slabo diferencovaný epidermoidný karcinóm (stupeň III) u nahých myší. To z nich robí vynikajúci model na štúdium progresie rakoviny a testovanie protirakovinových liekov.

Bunková línia SiHa exprimuje rôzne izoenzýmy vrátane AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 a PGM3. Elektrónová mikroskopia odhalila hojné tonofilamenty v cytoplazme a desmozómy na bunkových spojoch. Rastové vlastnosti buniek SiHa sú adherentné, s časom zdvojenia 17 hodín v 10 % FBS médiu a 21 hodín v 5 % FBS médiu. Expresia molekuly adhézie epitelových buniek (EpCAM) je prítomná v 92 % buniek SiHa, čo poukazuje na ich epitelový pôvod. Vykazujú silnú expresiu cytokeratínu, ale žiadnu expresiu vimentínu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke