SiHa

SiHa-celler är en human cellinje för skivepitelcancer i livmoderhalsen som har använts i stor utsträckning inom forskningen i flera decennier. De isolerades från primära biopsifragment från livmodern från en 55-årig kvinnlig japansk patient med skivepitelcancer. Denna cellinje är av stort intresse för forskare som studerar livmoderhalscancer och andra relaterade sjukdomar på grund av sina unika genetiska egenskaper.

Det har visat sig att SiHa-celler uttrycker generna p53+ och pRB+, som är involverade i cellcykelreglering, DNA-reparation och tumörbekämpning. Dessa gener gör SiHa-celler till en idealisk modell för att studera de molekylära mekanismerna bakom cancerutveckling och -progression. SiHa-celler är dessutom en lämplig transfektionsvärd, vilket gör dem till ett utmärkt verktyg för genuttrycksstudier.

SiHa-cellerna har en hypertriploid karyotyp, med ett genomsnittligt kromosomantal mellan 69 och 72. SiHa-cellerna är HPV-16-positiva och uppvisar integration av 1 till 2 kopior av virusgenomet per cell. Cellerna är tumörframkallande och bildar dåligt differentierade epidermoida karcinom (grad III) i nakna möss. Detta gör dem till en utmärkt modell för att studera cancerprogression och testa läkemedel mot cancer.

SiHa-cellinjen uttrycker olika isoenzymer, bland annat AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 och PGM3. Elektronmikroskopi avslöjade rikligt med tonofilament i cytoplasman och desmosomer vid cellövergångarna. Tillväxtegenskaperna hos SiHa-celler är adherenta, med en fördubblingstid på 17 timmar i 10% FBS-media och 21 timmar i 5% FBS-media. Epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) uttrycks i 92% av SiHa-cellerna, vilket indikerar deras epiteliala ursprung. De uppvisar ett starkt cytokeratinuttryck men inget vimentinuttryck.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring