SiHa

Le cellule SiHa sono una linea cellulare di carcinoma a cellule squamose della cervice uterina che è stata ampiamente utilizzata nella ricerca per diversi decenni. Sono state isolate da frammenti di biopsia uterina primaria di una paziente giapponese di 55 anni affetta da carcinoma a cellule squamose. Questa linea cellulare è di grande interesse per i ricercatori che studiano il cancro cervicale e altre malattie correlate, grazie alle sue caratteristiche genetiche uniche.

Le cellule SiHa esprimono i geni p53+ e pRB+, coinvolti nella regolazione del ciclo cellulare, nella riparazione del DNA e nella soppressione dei tumori. Questi geni rendono le cellule SiHa un modello ideale per studiare i meccanismi molecolari dello sviluppo e della progressione del cancro. Inoltre, le cellule SiHa sono un ospite adatto per la trasfezione, il che le rende uno strumento eccellente per gli studi di espressione genica.

Le cellule SiHa hanno un cariotipo ipertriploide, con un numero medio di cromosomi compreso tra 69 e 72. Le cellule SiHa sono positive all'HPV-16 e mostrano un'integrazione di 1 o 2 copie del genoma virale per cellula. Le cellule sono tumorigeniche e formano un carcinoma epidermoide scarsamente differenziato (grado III) in topi nudi. Ciò le rende un modello eccellente per lo studio della progressione del cancro e la sperimentazione di farmaci antitumorali.

La linea cellulare SiHa esprime diversi isoenzimi, tra cui AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 e PGM3. La microscopia elettronica ha rivelato abbondanti tonofilamenti nel citoplasma e desmosomi alle giunzioni cellulari. Le proprietà di crescita delle cellule SiHa sono aderenti, con un tempo di raddoppiamento di 17 ore in terreno con FBS al 10% e di 21 ore in terreno con FBS al 5%. L'espressione della molecola di adesione cellulare epiteliale (EpCAM) è presente nel 92% delle cellule SiHa, indicando la loro origine epiteliale. Mostrano una forte espressione di citocheratina ma non di vimentina.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia