Μετάβαση στο περιεχόμενο
SiHa
Ιστός
Τράχηλος μήτρας
Ασθένεια
Καρκίνωμα του τραχήλου της μήτρας που σχετίζεται με τον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων
Συνώνυμα
Siha, SIHA

Έγγραφα

SiHa

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305023

SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα SiHa είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά πλακώδους καρκινώματος του τραχήλου της μήτρας που χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα εδώ και αρκετές δεκαετίες. Απομονώθηκαν από θραύσματα πρωτογενούς βιοψίας μήτρας από μια 55χρονη Γιαπωνέζα ασθενή με πλακώδες καρκίνωμα. Αυτή η κυτταρική σειρά παρουσιάζει μεγάλο ενδιαφέρον για τους ερευνητές που μελετούν τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας και άλλες συναφείς ασθένειες λόγω των μοναδικών γενετικών χαρακτηριστικών της.

Έχει βρεθεί ότι τα κύτταρα SiHa εκφράζουν τα γονίδια p53+ και pRB+, τα οποία εμπλέκονται στη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου, την επιδιόρθωση του DNA και την καταστολή των όγκων. Τα γονίδια αυτά καθιστούν τα κύτταρα SiHa ιδανικό μοντέλο για τη μελέτη των μοριακών μηχανισμών ανάπτυξης και εξέλιξης του καρκίνου. Επιπλέον, τα κύτταρα SiHa είναι κατάλληλος ξενιστής διαμόλυνσης, γεγονός που τα καθιστά εξαιρετικό εργαλείο για μελέτες γονιδιακής έκφρασης.

Τα κύτταρα SiHa έχουν υπερτριπλοειδή καρυότυπο, με μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων μεταξύ 69 και 72. Τα κύτταρα SiHa είναι θετικά στον HPV-16, παρουσιάζοντας ενσωμάτωση 1 έως 2 αντιγράφων του ιικού γονιδιώματος ανά κύτταρο. Τα κύτταρα είναι καρκινικά, σχηματίζοντας φτωχά διαφοροποιημένο επιδερμοειδές καρκίνωμα (βαθμού ΙΙΙ) σε γυμνά ποντίκια. Αυτό τα καθιστά ένα εξαιρετικό μοντέλο για τη μελέτη της εξέλιξης του καρκίνου και τη δοκιμή αντικαρκινικών φαρμάκων.

Η κυτταρική σειρά SiHa εκφράζει διάφορα ισοένζυμα, συμπεριλαμβανομένων των AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 και PGM3. Η ηλεκτρονική μικροσκοπία αποκάλυψε άφθονα τονοϊνίδια στο κυτταρόπλασμα και δεσμοσώματα στις κυτταρικές συνδέσεις. Οι ιδιότητες ανάπτυξης των κυττάρων SiHa είναι προσκολλητικές, με χρόνο διπλασιασμού 17 ώρες σε μέσο 10% FBS και 21 ώρες σε μέσο 5% FBS. Η έκφραση του μορίου προσκόλλησης επιθηλιακών κυττάρων (EpCAM) είναι παρούσα στο 92% των κυττάρων SiHa, υποδεικνύοντας την επιθηλιακή τους προέλευση. Παρουσιάζουν έντονη έκφραση κυτταροκερατίνης αλλά όχι έκφραση βιμεντίνης.

Ιστός
Τράχηλος μήτρας
Ασθένεια
Καρκίνωμα του τραχήλου της μήτρας που σχετίζεται με τον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων
Συνώνυμα
  • Siha
  • SIHA

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό
Ογκογόνος
Ναι

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
SiHa (αριθμός καταλόγου Cytion 305023)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0032

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
55 χρόνια
Εθνικότητα
Ασιατικό