Skip to content
SiHa
Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งปากมดลูกชนิดเซลล์สความัสที่เกี่ยวข้องกับไวรัสฮิวแมนแพปพิลโลมา
Synonyms
Siha, SIHA

Documents

SiHa

Cell line · Product number 305023

SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ SiHa เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปากมดลูกชนิดเซลล์สความัสของมนุษย์ที่ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยมาหลายทศวรรษแล้ว เซลล์เหล่านี้ถูกแยกออกมาจากชิ้นเนื้อเยื่อที่ตัดจากมดลูกของผู้ป่วยหญิงชาวญี่ปุ่นอายุ 55 ปี ซึ่งมีมะเร็งเซลล์สความัสของปากมดลูก สายพันธุ์เซลล์นี้ได้รับความสนใจอย่างมากจากนักวิจัยที่ศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งปากมดลูกและโรคที่เกี่ยวข้อง เนื่องจากลักษณะทางพันธุกรรมที่เป็นเอกลักษณ์ของมัน

พบว่าเซลล์ SiHa แสดงออกของยีน p53+ และ pRB+ ซึ่งเกี่ยวข้องกับการควบคุมวัฏจักรของเซลล์ การซ่อมแซมดีเอ็นเอ และการยับยั้งการเกิดเนื้องอก ยีนเหล่านี้ทำให้เซลล์ SiHa เป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาเชิงโมเลกุลของกลไกการพัฒนาและการลุกลามของมะเร็ง นอกจากนี้ เซลล์ SiHa ยังเป็นโฮสต์ที่เหมาะสมสำหรับการถ่ายโอนยีน ทำให้เป็นเครื่องมือที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาการแสดงออกของยีน

เซลล์ SiHa มีโครโมโซมแบบไตรโซมีสูง โดยมีจำนวนโครโมโซมเฉลี่ยระหว่าง 69 ถึง 72 ตัว เซลล์ SiHa ให้ผลบวกต่อ HPV-16 แสดงการรวมตัวของจีโนมไวรัส 1 ถึง 2 ชุดต่อเซลล์ เซลล์เหล่านี้สามารถก่อเนื้องอกได้ โดยก่อให้เกิดมะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมไอด์ที่มีความแตกต่างต่ำ (ระดับ III) ในหนูเมาส์ที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน (nude mice) คุณสมบัตินี้ทำให้เซลล์ SiHa เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาการลุกลามของมะเร็งและการทดสอบยาต้านมะเร็ง

เซลล์ไลน์ SiHa แสดงออกของไอโซเอนไซม์หลายชนิด รวมถึง AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 และ PGM3 การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนพบโทโนฟิลิเมนต์จำนวนมากในไซโตพลาสซึมและเดสโมโซมที่บริเวณรอยต่อระหว่างเซลล์คุณสมบัติการเจริญเติบโตของเซลล์ SiHa คือการเกาะติด โดยมีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่า 17 ชั่วโมงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี FBS 10% และ 21 ชั่วโมงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี FBS 5% การแสดงออกของโมเลกุลยึดเกาะเซลล์เยื่อบุผิว (EpCAM) พบในเซลล์ SiHa ร้อยละ 92 ซึ่งบ่งชี้ถึงต้นกำเนิดจากเยื่อบุผิว เซลล์เหล่านี้แสดงการออกของโปรตีนไซโตเคราตินอย่างชัดเจน แต่ไม่แสดงการออกของโปรตีนวีเมนติน

Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งปากมดลูกชนิดเซลล์สความัสที่เกี่ยวข้องกับไวรัสฮิวแมนแพปพิลโลมา
Synonyms
  • Siha
  • SIHA

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่

04Identifiers

Citation
SiHa (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305023)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0032

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
55 ปี
Ethnicity
เอเชีย