Langsung ke isi
SiHa
Tisu
Serviks
Penyakit
Karsinoma sel skuamosa serviks terkait human papillomavirus
Sinonim
Siha, SIHA

SiHa

Cell line · Nomor produk 305023

SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Sel SiHa adalah garis sel karsinoma sel skuamosa serviks manusia yang telah digunakan secara luas dalam penelitian selama beberapa dekade. Sel ini diisolasi dari fragmen biopsi uterus primer dari pasien wanita Jepang berusia 55 tahun dengan karsinoma sel skuamosa. Garis sel ini sangat menarik bagi para peneliti yang mempelajari kanker serviks dan penyakit terkait lainnya karena karakteristik genetiknya yang unik.

Sel SiHa telah ditemukan mengekspresikan gen p53+ dan pRB+, yang terlibat dalam regulasi siklus sel, perbaikan DNA, dan penekanan tumor. Gen-gen ini menjadikan sel SiHa sebagai model yang ideal untuk mempelajari mekanisme molekuler perkembangan dan perkembangan kanker. Selain itu, sel SiHa merupakan inang transfeksi yang cocok, menjadikannya alat yang sangat baik untuk studi ekspresi gen.

Sel SiHa memiliki kariotipe hipertriploid, dengan jumlah kromosom rata-rata antara 69 dan 72. Sel SiHa positif HPV-16, menunjukkan integrasi 1 hingga 2 salinan genom virus per sel. Sel bersifat tumorigenik, membentuk karsinoma epidermoid yang berdiferensiasi buruk (grade III) pada tikus telanjang. Hal ini menjadikannya model yang sangat baik untuk mempelajari perkembangan kanker dan menguji obat anti-kanker.

Garis sel SiHa mengekspresikan berbagai isoenzim, termasuk AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1, dan PGM3. Mikroskopi elektron mengungkapkan tonofilamen yang melimpah di sitoplasma dan desmosom di persimpangan sel. Sifat pertumbuhan sel SiHa adalah melekat, dengan waktu penggandaan 17 jam dalam media FBS 10% dan 21 jam dalam media FBS 5%. Ekspresi molekul adhesi sel epitel (EpCAM) hadir pada 92% sel SiHa, yang menunjukkan asal usul epitel mereka. Mereka menunjukkan ekspresi sitokeratin yang kuat tetapi tidak ada ekspresi vimentin.

Tisu
Serviks
Penyakit
Karsinoma sel skuamosa serviks terkait human papillomavirus
Sinonim
  • Siha
  • SIHA

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel
Tumorigenik
Ya

04Pengidentifikasi

Referensi
SiHa (nomor katalog Cytion 305023)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0032

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Usia donor
55 tahun
Etnis
Asia