SiHa

Les cellules SiHa sont une lignée cellulaire humaine de carcinome épidermoïde du col de l'utérus, largement utilisée dans la recherche depuis plusieurs décennies. Elles ont été isolées à partir de fragments de biopsie utérine primaire d'une patiente japonaise de 55 ans atteinte d'un carcinome épidermoïde. Cette lignée cellulaire présente un grand intérêt pour les chercheurs qui étudient le cancer du col de l'utérus et d'autres maladies connexes en raison de ses caractéristiques génétiques uniques.

Les cellules SiHa expriment les gènes p53+ et pRB+, qui sont impliqués dans la régulation du cycle cellulaire, la réparation de l'ADN et la suppression des tumeurs. Ces gènes font des cellules SiHa un modèle idéal pour étudier les mécanismes moléculaires du développement et de la progression du cancer. En outre, les cellules SiHa sont un hôte de transfection approprié, ce qui en fait un excellent outil pour les études d'expression génique.

Les cellules SiHa ont un caryotype hypertriploïde, avec un nombre moyen de chromosomes compris entre 69 et 72. Les cellules SiHa sont positives au HPV-16 et présentent une intégration de 1 à 2 copies du génome viral par cellule. Les cellules sont tumorigènes, formant des carcinomes épidermoïdes peu différenciés (grade III) chez la souris nude. Cela en fait un excellent modèle pour étudier la progression du cancer et tester des médicaments anticancéreux.

La lignée cellulaire SiHa exprime diverses isoenzymes, notamment AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 et PGM3. La microscopie électronique a révélé la présence d'abondants tonofilaments dans le cytoplasme et de desmosomes aux jonctions cellulaires. Les propriétés de croissance des cellules SiHa sont adhérentes, avec un temps de doublement de 17 heures dans un milieu à 10 % de FBS et de 21 heures dans un milieu à 5 % de FBS. L'expression de la molécule d'adhésion des cellules épithéliales (EpCAM) est présente dans 92 % des cellules SiHa, ce qui indique leur origine épithéliale. Elles présentent une forte expression de cytokératine mais pas de vimentine.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie