Skip to content
SiHa
Tissue
Cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô vảy cổ tử cung liên quan đến virus papilloma ở người (HPV)
Synonyms
Siha, SIHA

Documents

SiHa

Cell line · Product number 305023

SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào SiHa là dòng tế bào ung thư biểu mô vảy cổ tử cung của người, đã được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu trong nhiều thập kỷ. Chúng được tách ra từ các mẫu sinh thiết tử cung nguyên phát của một bệnh nhân nữ người Nhật Bản 55 tuổi bị ung thư biểu mô vảy. Dòng tế bào này thu hút sự quan tâm lớn của các nhà nghiên cứu về ung thư cổ tử cung và các bệnh liên quan khác do đặc điểm di truyền độc đáo của chúng.

Tế bào SiHa được phát hiện có biểu hiện các gen p53+ và pRB+, tham gia vào điều hòa chu kỳ tế bào, sửa chữa DNA và ức chế khối u. Các gen này khiến tế bào SiHa trở thành mô hình lý tưởng để nghiên cứu các cơ chế phân tử của sự phát triển và tiến triển ung thư. Ngoài ra, tế bào SiHa là vật chủ chuyển gen phù hợp, làm cho chúng trở thành công cụ tuyệt vời cho các nghiên cứu biểu hiện gen.

Tế bào SiHa có karyotype hypertriploid, với số lượng nhiễm sắc thể trung bình từ 69 đến 72. Tế bào SiHa dương tính với HPV-16, cho thấy sự tích hợp của 1 đến 2 bản sao của bộ gen virus trong mỗi tế bào. Tế bào có khả năng gây ung thư, hình thành ung thư biểu mô không biệt hóa (độ III) ở chuột nude. Điều này khiến chúng trở thành mô hình tuyệt vời để nghiên cứu sự tiến triển của ung thư và thử nghiệm các thuốc chống ung thư.

Dòng tế bào SiHa biểu hiện các isoenzyme khác nhau, bao gồm AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 và PGM3. Kính hiển vi điện tử cho thấy sự hiện diện dồi dào của các sợi tonofilament trong tế bào chất và desmosome tại các điểm tiếp xúc tế bào. Tính chất tăng trưởng của tế bào SiHa là bám dính, với thời gian nhân đôi là 17 giờ trong môi trường 10% FBS và 21 giờ trong môi trường 5% FBS. Biểu hiện của phân tử bám dính biểu mô (EpCAM) có mặt ở 92% tế bào SiHa, cho thấy nguồn gốc biểu mô của chúng. Chúng biểu hiện mạnh cytokeratin nhưng không biểu hiện vimentin.

Tissue
Cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô vảy cổ tử cung liên quan đến virus papilloma ở người (HPV)
Synonyms
  • Siha
  • SIHA

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Thượng bì
Tumourigenic
Có

04Identifiers

Citation
SiHa (Mã sản phẩm Cytion 305023)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0032

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
55 năm
Ethnicity
Châu Á