Preskoči na vsebino
SiHa
Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
S človeškim papilomavirusom povezan ploščatocelični karcinom materničnega vratu
Sinonimi
Siha, SIHA

Dokumenti

SiHa

Cell line · Številka izdelka 305023

SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice SiHa so celična linija ploščatoceličnega karcinoma materničnega vratu, ki se že več desetletij pogosto uporablja v raziskavah. Izolirane so bile iz fragmentov primarne biopsije maternice 55-letne japonske pacientke s ploščatoceličnim karcinomom. Ta celična linija je zaradi svojih edinstvenih genetskih značilnosti zelo zanimiva za raziskovalce, ki proučujejo raka materničnega vratu in druge sorodne bolezni.

Ugotovljeno je bilo, da celice SiHa izražajo gena p53+ in pRB+, ki sta vključena v uravnavanje celičnega cikla, popravljanje DNK in zatiranje tumorjev. Zaradi teh genov so celice SiHa idealen model za preučevanje molekularnih mehanizmov razvoja in napredovanja raka. Poleg tega so celice SiHa primeren gostitelj za transfekcijo, zato so odlično orodje za študije izražanja genov.

Celice SiHa imajo hipertriploidni kariotip s povprečnim številom kromosomov med 69 in 72. Celice SiHa so HPV-16 pozitivne in kažejo integracijo 1 do 2 kopij virusnega genoma na celico. Celice so tumorogene in tvorijo slabo diferenciran epidermoidni karcinom (stopnja III) pri golih miših. Zato so odličen model za preučevanje napredovanja raka in testiranje zdravil proti raku.

Celična linija SiHa izraža različne izoencime, vključno z AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 in PGM3. Elektronska mikroskopija je razkrila veliko tonofilamentov v citoplazmi in desmosomov na celičnih stikih. Rast celic SiHa je adherentna, njihov čas podvojitve je 17 ur v 10 % FBS mediju in 21 ur v 5 % FBS mediju. Pri 92 % celic SiHa je prisotno izražanje epitelijske celične adhezijske molekule (EpCAM), kar kaže na njihov epitelijski izvor. Izrazito izražajo citokeratin, ne izražajo pa vimentina.

Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
S človeškim papilomavirusom povezan ploščatocelični karcinom materničnega vratu
Sinonimi
  • Siha
  • SIHA

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Tumorigeničen
Da

04Identifikatorji

Navajanje vira
SiHa (kataloška številka Cytion 305023)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0032

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
55 let
Etnična pripadnost
Azijski