SiHa

Komórki SiHa to ludzka linia komórkowa raka płaskonabłonkowego szyjki macicy, która jest szeroko stosowana w badaniach od kilku dekad. Zostały one wyizolowane z pierwotnych fragmentów biopsji macicy 55-letniej japońskiej pacjentki z rakiem płaskonabłonkowym. Ta linia komórkowa jest bardzo interesująca dla naukowców badających raka szyjki macicy i inne powiązane choroby ze względu na ich unikalne cechy genetyczne.

Stwierdzono, że komórki SiHa wykazują ekspresję genów p53+ i pRB+, które są zaangażowane w regulację cyklu komórkowego, naprawę DNA i supresję nowotworów. Geny te sprawiają, że komórki SiHa są idealnym modelem do badania molekularnych mechanizmów rozwoju i progresji nowotworów. Dodatkowo, komórki SiHa są odpowiednim gospodarzem do transfekcji, co czyni je doskonałym narzędziem do badań ekspresji genów.

Komórki SiHa mają kariotyp hipertriploidalny, ze średnią liczbą chromosomów pomiędzy 69 a 72. Komórki SiHa są HPV-16 dodatnie, wykazując integrację od 1 do 2 kopii genomu wirusa na komórkę. Komórki są nowotworowe, tworząc słabo zróżnicowanego raka naskórka (stopień III) u nagich myszy. Czyni je to doskonałym modelem do badania progresji raka i testowania leków przeciwnowotworowych.

Linia komórkowa SiHa wykazuje ekspresję różnych izoenzymów, w tym AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 i PGM3. Mikroskopia elektronowa ujawniła obfite tonofilamenty w cytoplazmie i desmosomy na połączeniach komórkowych. Właściwości wzrostu komórek SiHa są adherentne, z czasem podwojenia wynoszącym 17 godzin w pożywce 10% FBS i 21 godzin w pożywce 5% FBS. Ekspresja cząsteczki adhezji komórek nabłonkowych (EpCAM) jest obecna w 92% komórek SiHa, co wskazuje na ich nabłonkowe pochodzenie. Wykazują one silną ekspresję cytokeratyny, ale nie wykazują ekspresji wimentyny.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym