İçeriğe atla
SiHa
Doku
Serviks
Hastalık
İnsan papilloma virüsü ile ilişkili servikal skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
Siha, SIHA

SiHa

Cell line · Ürün numarası 305023

SiHa cells are a human cervical squamous cell carcinoma cell line that has been widely used in research for several decades. They were isolated from prima...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

SiHa hücreleri, birkaç on yıldır araştırmalarda yaygın olarak kullanılan bir insan servikal skuamöz hücreli karsinom hücre hattıdır. Bu hücreler, 55 yaşında skuamöz hücreli karsinomlu bir Japon kadın hastadan alınan primer uterus biyopsi parçalarından izole edilmiştir. Bu hücre hattı, benzersiz genetik özellikleri nedeniyle rahim ağzı kanseri ve diğer ilgili hastalıkları inceleyen araştırmacılar için büyük ilgi görmektedir.

SiHa hücrelerinin hücre döngüsü düzenlemesi, DNA onarımı ve tümör baskılanmasında rol oynayan p53+ ve pRB+ genlerini ifade ettiği bulunmuştur. Bu genler SiHa hücrelerini kanser gelişimi ve ilerlemesinin moleküler mekanizmalarını incelemek için ideal bir model haline getirmektedir. Ek olarak, SiHa hücreleri uygun bir transfeksiyon konağıdır, bu da onları gen ekspresyonu çalışmaları için mükemmel bir araç haline getirir.

SiHa hücreleri, ortalama kromozom sayısı 69 ila 72 arasında olan hipertriploid bir karyotipe sahiptir. SiHa hücreleri HPV-16 pozitiftir ve hücre başına viral genomun 1 ila 2 kopyasının entegrasyonunu gösterir. Hücreler tümörijeniktir ve çıplak farelerde az farklılaşmış epidermoid karsinom (derece III) oluşturur. Bu da onları kanser ilerlemesini incelemek ve anti-kanser ilaçlarını test etmek için mükemmel bir model haline getirmektedir.

SiHa hücre hattı AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ve PGM3 dahil olmak üzere çeşitli izoenzimleri ifade eder. Elektron mikroskobu, sitoplazmada bol miktarda tonofilament ve hücre kavşaklarında desmozomlar olduğunu ortaya koymuştur. SiHa hücrelerinin büyüme özellikleri yapışıktır ve ikiye katlanma süresi %10 FBS ortamında 17 saat ve %5 FBS ortamında 21 saattir. Epitelyal hücre adezyon molekülü (EpCAM) ekspresyonu SiHa hücrelerinin %92'sinde mevcuttur, bu da epitelyal kökenli olduklarını gösterir. Güçlü sitokeratin ekspresyonu gösterirler ancak vimentin ekspresyonu göstermezler.

Doku
Serviks
Hastalık
İnsan papilloma virüsü ile ilişkili servikal skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
  • Siha
  • SIHA

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Tümör oluşturucu
Evet

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
SiHa (Cytion katalog numarası 305023)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0032

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
55 yıl
Etnik köken
Asya