C2C12

La lignée cellulaire C2C12, une lignée de myoblastes de souris immortalisés dérivée du muscle de la cuisse d’une souris âgée de deux mois de la souche C3H, est largement utilisée dans la recherche biomédicale en raison de ses propriétés uniques de différenciation cellulaire. Les myoblastes C2C12 prolifèrent rapidement et présentent les caractéristiques typiques des myoblastes dans des conditions de forte concentration sérique. Lorsqu’on les soumet à des conditions de faible concentration sérique ou à une privation de nutriments, les cellules C2C12 entament une différenciation myogénique et se transforment en myotubes, qui sont les précurseurs des cellules contractiles du muscle squelettique.

Les cellules C2C12 intègrent facilement de l’ADNc et des acides nucléiques exogènes par transfection, ce qui en fait un excellent choix pour les études d’expression génique et les recherches sur la différenciation des myoblastes et des myotubes. Le processus de différenciation est marqué par l’expression de marqueurs myogéniques tels que Myf5, MyoD, Myogenin et Mrf4, ainsi que de marqueurs spécifiques aux muscles comme Csrp3 et Mef2a, qui sont essentiels à l’étude des différents phénotypes musculaires et à la régénération du muscle squelettique.

La forme unique des myoblastes C2C12 et leur transformation en anneaux de myoblastes, puis en myotubes matures dans des milieux enrichis en sérum, soulignent la nature dynamique de ces cellules et leur potentiel dans la recherche sur le muscle squelettique.

Les chercheurs utilisent des substrats tels que les hydrogels de gélatine pour les cultures cellulaires de C2C12 afin de simuler les conditions musculaires in vivo, ce qui permet des études détaillées sur le développement des cellules musculaires et les effets de la matrice extracellulaire. Le profilage métabolique fournit des informations clés sur les voies impliquées dans la formation et la récupération musculaires, en mettant l’accent sur les protéines essentielles et le rôle du calcium dans la contraction. Les techniques de silençage génique éclairent davantage le processus de différenciation, soulignant l’importance de la phosphorylation de SMAD1 dans la régénération musculaire, ce qui est crucial pour comprendre la récupération en cas d’atrophie et de lésions musculaires.

En résumé, la lignée cellulaire C2C12 constitue un outil essentiel dans le domaine de la recherche biomédicale, offrant une plateforme polyvalente pour explorer les subtilités de la formation et de la différenciation musculaires, de l’expression génique, ainsi que de l’impact profond de divers facteurs sur la lignée cellulaire du muscle squelettique, y compris le rôle central des myofilaments, des protéines des filaments intermédiaires et du contexte organismique global dans lequel ces processus cellulaires se déroulent.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.