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C2C12
Tissue
肌肉
Synonyms
C2c12, C2-C12, C12

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C2C12

Cell line · Product number 400476

The C2C12 cell line, an immortalized mouse myoblast cell line derived from the thigh muscle of a 2-month-old mouse of the C3H mouse strain, is extensively...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

C2C12 细胞系是一种永生的小鼠成肌细胞系,来源于 2 个月大的 C3H 小鼠品系的大腿肌肉,因其独特的细胞分化特性而被广泛用于生物医学研究。C2C12 肌母细胞在高血清条件下可快速增殖并表现出典型的肌母细胞特征。转入低血清或饥饿状态后,C2C12 细胞开始肌原分化,转变为肌管,肌管是收缩性骨骼肌细胞的前体。

C2C12 细胞很容易通过转染结合外源 cDNA 和核酸,因此是基因表达研究和肌母细胞与肌管分化研究的良好选择。分化过程中会表达 Myf5、MyoD、Myogenin 和 Mrf4 等肌原标志物,以及 Csrp3 和 Mef2a 等肌肉特异性标志物,这些标志物对研究不同的肌肉表型和骨骼肌再生至关重要。

C2C12 肌母细胞的独特形状及其在血清补充培养基中转化为肌母细胞环和随后转化为成熟肌管的过程强调了这些细胞的动态性质及其在骨骼肌研究中的潜力。

研究人员使用明胶水凝胶等基质进行 C2C12 细胞培养,以模拟体内肌肉条件,从而对肌肉细胞发育和细胞外基质效应进行详细研究。新陈代谢分析揭示了肌肉形成和恢复过程中的关键途径,重点研究了必需蛋白和钙在收缩过程中的作用。基因沉默技术进一步阐明了分化过程,突出了 SMAD1 磷酸化在肌肉再生中的重要作用,这对了解肌肉萎缩和损伤中的恢复至关重要。

总之,C2C12 细胞系是生物医学研究领域的一个重要工具,为探索肌肉形成、分化、基因表达的复杂性以及各种因素对骨骼肌细胞系的深远影响提供了一个多功能平台,包括肌丝、中间丝蛋白的关键作用以及这些细胞过程所处的整个生物体环境。

Tissue
肌肉
Applications
转染宿主
Synonyms
  • C2c12
  • C2-C12
  • C12

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
肌母细胞样
Cell type
肌细胞
Doubling time
24 小时

04Identifiers

Citation
C2C12(Cytion 目录号 400476)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0188

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Seeding density
1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合细胞层
Fluid renewal
每 3 至 5 天
Post-thaw recovery
解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

07Donor

Breed / subspecies
C3H
Donor age
2 个月