C2C12

C2C12 šūnu līnija, kas ir imortizēta peļu mioblastu šūnu līnija, kas iegūta no C3H peļu celma 2 mēnešus vecu peļu augšstilba muskuļiem, tiek plaši izmantota biomedicīnas pētījumos, pateicoties tās unikālajām šūnu diferenciācijas īpašībām. C2C12 mioblastu šūnas strauji vairojas un tām piemīt tipiskas mioblastu īpašības augsta seruma satura apstākļos. Pārejot uz zema seruma satura apstākļiem vai badu, C2C12 šūnas sāk miogēnisku diferenciāciju, pārvēršoties par miotubulām, kas ir pirmtēvi kontraktilām skeleta muskuļu šūnām.

C2C12 šūnas viegli inkorporē eksogēnu cDNS un nukleīnskābes, izmantojot transfekciju, tāpēc tās ir laba izvēle gēnu ekspresijas pētījumiem un mioblastu un miotubu diferenciācijas izpētei. Diferenciācijas procesu raksturo miogēno marķieru, piemēram, Myf5, MyoD, Myogenin un Mrf4, ekspresija, kā arī muskuļu specifisko marķieru, piemēram, Csrp3 un Mef2a, kas ir būtiski dažādu muskuļu fenotipu un skeleta muskuļu reģenerācijas izpētē.

C2C12 mioblastu unikālā forma un to transformācija par mioblastu šūnu gredzeniem un pēc tam par nobriedušiem miotubuliem seruma papildinātā barotnē uzsver šo šūnu dinamisko dabu un to potenciālu skeleta muskuļu pētniecībā.

Pētnieki C2C12 šūnu kultūrām izmanto tādus substrātus kā želatīna hidrogēli, lai imitētu in vivo muskuļu apstākļus, kas ļauj detalizēti pētīt muskuļu šūnu attīstību un ekstracelulārā matriksa ietekmi. Metaboliskā profilēšana atklāj būtiskas atziņas par muskuļu veidošanā un atjaunošanā iesaistītajiem ceļiem, koncentrējoties uz būtiskiem proteīniem un kalcija lomu kontrakcijā. Gēnu slāpēšanas metodes vēl vairāk izgaismo diferenciācijas procesu, uzsverot SMAD1 fosforilēšanas nozīmi muskuļu reģenerācijā, kas ir ļoti svarīga, lai izprastu atveseļošanos muskuļu novājēšanas un traumu gadījumos.

Kopumā C2C12 šūnu līnija kalpo kā būtisks instruments biomedicīnisko pētījumu jomā, piedāvājot daudzpusīgu platformu muskuļu veidošanās, diferenciācijas, gēnu ekspresijas un dažādu faktoru dziļās ietekmes uz skeleta muskuļu šūnu veidošanos, tostarp miofilamentu, starpfilamentu proteīnu un vispārējā organisma konteksta, kurā norisinās šie šūnu procesi, izpētes sarežģītību.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu