C2C12
Cell line · Številka izdelka 400476
The C2C12 cell line, an immortalized mouse myoblast cell line derived from the thigh muscle of a 2-month-old mouse of the C3H mouse strain, is extensively...
Prilagajanje / Priporočila
- C2C12Cell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celična linija C2C12, imortalizirana mišja mioblastna celična linija, pridobljena iz stegenske mišice dvomesečne miši seva C3H, se zaradi svojih edinstvenih lastnosti diferenciacije celic pogosto uporablja v biomedicinskih raziskavah. Mioblastne celice C2C12 se hitro razmnožujejo in imajo tipične značilnosti mioblastov v pogojih z visoko vsebnostjo seruma. Ob prehodu na pogoje z nizko vsebnostjo seruma ali stradanju celice C2C12 začnejo miogensko diferenciacijo in preidejo v miotube, ki so predhodnice krčljivih skeletnih mišičnih celic.
C2C12 celice s transfekcijo zlahka vključijo eksogeno cDNA in nukleinske kisline, zato so dobra izbira za študije izražanja genov in raziskave diferenciacije mioblastov in miotubusov. Proces diferenciacije zaznamuje izražanje miogenih označevalcev, kot so Myf5, MyoD, Myogenin in Mrf4, poleg mišično-specifičnih označevalcev, kot sta Csrp3 in Mef2a, ki so bistveni pri preučevanju različnih mišičnih fenotipov in regeneraciji skeletnih mišic.
Edinstvena oblika mioblastov C2C12 in njihova transformacija v obroče mioblastnih celic ter nato v zrele miotube v mediju, dopolnjenem s serumom, poudarjajo dinamično naravo teh celic in njihov potencial pri raziskavah skeletnih mišic.
Raziskovalci uporabljajo substrate, kot so želatinasti hidrogeli za kulture celic C2C12, da bi simulirali pogoje v mišicah in vivo, kar omogoča podrobne študije razvoja mišičnih celic in učinkov zunajceličnega matriksa. Metabolično profiliranje razkriva ključna spoznanja o poteh, ki so vključene v nastajanje in obnovo mišic, s poudarkom na bistvenih beljakovinah in vlogi kalcija pri krčenju. Tehnike utišanja genov dodatno osvetljujejo proces diferenciacije in poudarjajo pomen fosforilacije SMAD1 pri regeneraciji mišic, kar je ključnega pomena za razumevanje okrevanja pri mišični izčrpanosti in poškodbah.
Če povzamemo, celična linija C2C12 služi kot ključno orodje na področju biomedicinskih raziskav in ponuja vsestransko platformo za raziskovanje zapletenosti nastajanja mišic, diferenciacije, izražanja genov in velikega vpliva različnih dejavnikov na celično linijo skeletnih mišic, vključno s ključno vlogo miofilamentov, proteinov vmesnih filamentov in splošnega konteksta organizma, v katerem se ti celični procesi odvijajo.
- Tkivo
- Mišice
- Uporaba
- Gostitelj za transfekcijo
- Sinonimi
- C2c12
- C2-C12
- C12
02Razvrstitev
- Organizem
- Miška
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Mioblastom podobni
- Vrsta celice
- Mioblasti
- Čas podvojitve
- 24 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- C2C12 (kataloška številka Cytion 400476)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0188
05Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Gostota setve
- 1 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh oblikovalo konfluentno plast.
- Obnova tekočine
- Vsakih 3 do 5 dni
- Obnova po odtaljevanju
- Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
07Donator
- Pasma / podvrsta
- C3H
- Starost darovalca
- 2 meseca
08Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Izjava o omejitvi odgovornosti
- Naše celice so na voljo izključno za laboratorijske raziskave in vitro in niso namenjene za klinično ali diagnostično uporabo, niti jih ni dovoljeno dajati ljudem ali uporabljati v veterinarske namene. Uporabniki morajo upoštevati vse veljavne smernice in predpise za ravnanje in uporabo teh celic v raziskovalnem okolju.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
.jpg)
