C2C12

A linha celular C2C12, uma linha celular imortalizada de mioblastos de ratinho derivada do músculo da coxa de um ratinho de 2 meses de idade da estirpe C3H, é amplamente utilizada na investigação biomédica pelas suas propriedades únicas de diferenciação celular. As células de mioblastos C2C12 proliferam rapidamente e apresentam caraterísticas típicas de mioblastos em condições de elevado teor de soro. Ao passar para condições de baixo teor de soro ou de inanição, as células C2C12 iniciam a diferenciação miogénica, transitando para miotubos, que são precursores das células musculares esqueléticas contrácteis.

As células C2C12 incorporam facilmente cDNA e ácidos nucleicos exógenos através de transfecção, o que as torna uma boa escolha para estudos de expressão genética e investigações sobre a diferenciação de mioblastos e miotubos. O processo de diferenciação é marcado pela expressão de marcadores miogénicos como Myf5, MyoD, Myogenin e Mrf4, juntamente com marcadores específicos do músculo como Csrp3 e Mef2a, que são essenciais no estudo de diferentes fenótipos musculares e da regeneração do músculo esquelético.

A forma única dos mioblastos C2C12 e a sua transformação em anéis de células mioblásticas e, subsequentemente, em miotubos maduros em meios suplementados com soro sublinham a natureza dinâmica destas células e o seu potencial na investigação do músculo esquelético.

Os investigadores utilizam substratos como hidrogéis de gelatina para culturas de células C2C12 para simular as condições do músculo in vivo, permitindo estudos pormenorizados do desenvolvimento das células musculares e dos efeitos da matriz extracelular. A análise do perfil metabólico revela conhecimentos fundamentais sobre as vias envolvidas na formação e recuperação muscular, centrando-se nas proteínas essenciais e no papel do cálcio na contração. As técnicas de silenciamento de genes iluminam ainda mais o processo de diferenciação, destacando a importância da fosforilação de SMAD1 na regeneração muscular, crucial para a compreensão da recuperação na perda de massa muscular e nas lesões.

Em suma, a linha celular C2C12 constitui uma ferramenta fundamental no domínio da investigação biomédica, oferecendo uma plataforma versátil para explorar os meandros da formação e diferenciação muscular, a expressão genética e o impacto profundo de vários factores na linhagem celular do músculo esquelético, incluindo o papel fundamental dos miofilamentos, das proteínas dos filamentos intermédios e do contexto global do organismo em que estes processos celulares se desenrolam.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia