C2C12

La línea celular C2C12, una línea celular inmortalizada de mioblastos de ratón derivada del músculo del muslo de un ratón de 2 meses de la cepa C3H, se utiliza ampliamente en la investigación biomédica por sus propiedades únicas de diferenciación celular. Los mioblastos C2C12 proliferan rápidamente y presentan características típicas de mioblastos en condiciones de suero elevado. Al pasar a condiciones de bajo nivel de suero o inanición, las células C2C12 inician la diferenciación miogénica, transformándose en miotubos, precursores de las células musculares esqueléticas contráctiles.

Las células C2C12 incorporan fácilmente ADNc y ácidos nucleicos exógenos mediante transfección, lo que las convierte en una buena elección para estudios de expresión génica e investigaciones sobre la diferenciación de mioblastos y miotubos. El proceso de diferenciación está marcado por la expresión de marcadores miogénicos como Myf5, MyoD, Myogenin y Mrf4, junto con marcadores específicos de músculo como Csrp3 y Mef2a, que son esenciales para estudiar diferentes fenotipos musculares y la regeneración del músculo esquelético.

La forma única de los mioblastos C2C12 y su transformación en anillos celulares mioblásticos y posteriormente en miotubos maduros en medios suplementados con suero subrayan la naturaleza dinámica de estas células y su potencial en la investigación del músculo esquelético.

Los investigadores utilizan sustratos como hidrogeles de gelatina para cultivos de células C2C12 con el fin de simular las condiciones del músculo in vivo, lo que permite realizar estudios detallados del desarrollo de las células musculares y los efectos de la matriz extracelular. Los perfiles metabólicos revelan aspectos clave de las vías implicadas en la formación y recuperación muscular, centrándose en las proteínas esenciales y el papel del calcio en la contracción. Las técnicas de silenciamiento de genes iluminan aún más el proceso de diferenciación, destacando la importancia de la fosforilación de SMAD1 en la regeneración muscular, crucial para comprender la recuperación en el desgaste muscular y las lesiones.

En resumen, la línea celular C2C12 constituye una herramienta fundamental en el ámbito de la investigación biomédica, ya que ofrece una plataforma versátil para explorar los entresijos de la formación muscular, la diferenciación, la expresión génica y el profundo impacto de diversos factores en el linaje celular del músculo esquelético, incluido el papel fundamental de los miofilamentos, las proteínas de filamentos intermedios y el contexto general del organismo en el que se desarrollan estos procesos celulares.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía