الانتقال إلى المحتوى
C2C12
الأنسجة
العضلات
المرادفات
C2c12, C2-C12, C12

المستندات

C2C12

Cell line · رقم المنتج 400476

The C2C12 cell line, an immortalized mouse myoblast cell line derived from the thigh muscle of a 2-month-old mouse of the C3H mouse strain, is extensively...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

يُستخدم خط الخلايا C2C12، وهو خط خلايا أرومة عضلية عضلية للفأر غير مخلد مشتق من عضلة الفخذ لفأر يبلغ من العمر شهرين من سلالة الفأر C3H، على نطاق واسع في الأبحاث الطبية الحيوية لخصائصه الفريدة في تمايز الخلايا. تتكاثر خلايا الأرومة العضلية C2C12 بسرعة وتظهر خصائص الأرومة العضلية النموذجية في ظل ظروف ارتفاع المصل. وعند التحول إلى ظروف المصل المنخفضة أو التجويع، تبدأ خلايا C2C12 في التمايز العضلي المنشأ، وتتحول إلى أنابيب عضلية والتي هي سلائف لخلايا العضلات الهيكلية المقلصة.

تقوم خلايا C2C12 بدمج الحمض النووي الريبي المنقوص الأكسجين والأحماض النووية الخارجية من خلال نقل الدم بسهولة، مما يجعلها خياراً جيداً لدراسات التعبير الجيني والتحقيقات في تمايز الأرومات العضلية والأنابيب العضلية. وتتميز عملية التمايز بالتعبير عن العلامات العضلية مثل Myf5 وMyoD وMyogenin وMrf4، إلى جانب العلامات الخاصة بالعضلات مثل Csrp3 وMef2a، والتي تعتبر ضرورية في دراسة الأنماط الظاهرية المختلفة للعضلات وتجديد العضلات الهيكلية.

يُبرز الشكل الفريد للخلايا العضلية C2C12 وتحولها إلى حلقات الخلايا العضلية ثم إلى أنابيب عضلية ناضجة في الأوساط الملقحة بالمصل الطبيعة الديناميكية لهذه الخلايا وإمكاناتها في أبحاث العضلات الهيكلية.

يستخدم الباحثون ركائز مثل الهلاميات المائية الجيلاتينية لمزارع الخلايا C2C12 لمحاكاة ظروف العضلات في الجسم الحي، مما يتيح إجراء دراسات مفصلة عن تطور الخلايا العضلية وتأثيرات المصفوفة خارج الخلية. ويكشف التنميط الأيضي عن رؤى رئيسية في المسارات التي تنطوي عليها عملية تكوين العضلات واستعادتها، مع التركيز على البروتينات الأساسية ودور الكالسيوم في الانقباض. وتسلط تقنيات إسكات الجينات مزيداً من الضوء على عملية التمايز، مع تسليط الضوء على أهمية فسفرة SMAD1 في تجديد العضلات، وهو أمر بالغ الأهمية لفهم التعافي في حالة هزال العضلات وإصابتها.

باختصار، يُستخدم خط الخلايا C2C12 كأداة مهمة في مجال الأبحاث الطبية الحيوية، حيث يوفر منصة متعددة الاستخدامات لاستكشاف تعقيدات تكوين العضلات والتمايز والتعبير الجيني والتأثير العميق للعوامل المختلفة على سلالة خلايا العضلات الهيكلية، بما في ذلك الدور المحوري للأشرطة العضلية وبروتينات الخيوط الوسيطة والسياق العام للكائن الحي الذي تتكشف فيه هذه العمليات الخلوية.

الأنسجة
العضلات
التطبيقات
مضيف نقل العدوى
المرادفات
  • C2c12
  • C2-C12
  • C12

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالأرومة العضلية
نوع الخلية
ميوبلاست
زمن المضاعفة
24 ساعة

04المعرّفات

المرجع
C2C12 (كتالوج سيتيون رقم 400476)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0188

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستنتج طبقة متقاربة في حوالي 4 أيام
تجديد السوائل
كل 3 إلى 5 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
C3H
عمر المتبرع
2 شهران