C2C12

C2C12-cellelinjen, en udødeliggjort myoblastcellelinje fra mus som stammer fra lårmuskelen til en 2 måneder gammel mus av C3H-stammen, er mye brukt i biomedisinsk forskning på grunn av sine unike celledifferensieringsegenskaper. C2C12-myoblastceller formerer seg raskt og viser typiske myoblastkarakteristika under forhold med høyt seruminnhold. Ved overgang til lavserumbetingelser eller sult starter C2C12-cellene myogen differensiering og blir til myotuber, som er forløpere til kontraktile skjelettmuskelceller.

C2C12-celler inkorporerer eksogent cDNA og nukleinsyrer gjennom transfeksjon, noe som gjør dem til et godt valg for genekspresjonsstudier og undersøkelser av differensiering av myoblaster og myotuber. Differensieringsprosessen kjennetegnes av uttrykk av myogene markører som Myf5, MyoD, Myogenin og Mrf4, i tillegg til muskelspesifikke markører som Csrp3 og Mef2a, som er viktige for å studere ulike muskelfenotyper og regenerering av skjelettmuskulatur.

Den unike formen til C2C12-myoblastene og deres transformasjon til myoblastcelleringer og deretter til modne myotuber i serumtilførte medier understreker disse cellenes dynamiske natur og deres potensial i skjelettmuskelforskning.

Forskere bruker substrater som gelatinhydrogeler til C2C12-cellekulturer for å simulere in vivo-muskelforhold, noe som muliggjør detaljerte studier av muskelcelleutvikling og effekter på ekstracellulær matriks. Metabolsk profilering gir viktig innsikt i de veiene som er involvert i muskeldannelse og restitusjon, med fokus på essensielle proteiner og kalsiumets rolle i sammentrekning. Genslukkingsteknikker belyser differensieringsprosessen ytterligere, og fremhever betydningen av SMAD1-fosforylering i muskelregenerering, noe som er avgjørende for å forstå restitusjon ved muskelsvinn og muskelskade.

C2C12-cellelinjen er et viktig verktøy i biomedisinsk forskning, og den tilbyr en allsidig plattform for å utforske de kompliserte aspektene ved muskeldannelse, differensiering, genuttrykk og den dyptgripende innvirkningen ulike faktorer har på skjelettmuskelcellelinjen, inkludert den sentrale rollen myofilamenter og intermediære filamentproteiner spiller, samt den overordnede organismiske konteksten som disse cellulære prosessene utspiller seg i.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring