C2C12

Linia komórkowa C2C12, unieśmiertelniona mysia linia komórkowa mioblastów pochodząca z mięśnia uda 2-miesięcznej myszy szczepu C3H, jest szeroko wykorzystywana w badaniach biomedycznych ze względu na jej unikalne właściwości różnicowania komórek. Komórki mioblastów C2C12 proliferują szybko i wykazują typowe cechy mioblastów w warunkach wysokiego stężenia surowicy. Po przejściu do warunków niskiej zawartości surowicy lub głodzenia, komórki C2C12 inicjują różnicowanie miogenne, przekształcając się w miotuby, które są prekursorami kurczliwych komórek mięśni szkieletowych.

Komórki C2C12 łatwo przyjmują egzogenne cDNA i kwasy nukleinowe poprzez transfekcję, co czyni je dobrym wyborem do badań ekspresji genów i badań nad różnicowaniem mioblastów i miotub. Proces różnicowania charakteryzuje się ekspresją markerów miogenicznych, takich jak Myf5, MyoD, Myogenin i Mrf4, wraz z markerami specyficznymi dla mięśni, takimi jak Csrp3 i Mef2a, które są niezbędne w badaniu różnych fenotypów mięśni i regeneracji mięśni szkieletowych.

Unikalny kształt mioblastów C2C12 i ich transformacja w pierścienie komórek mioblastów, a następnie w dojrzałe miotuby w pożywce z dodatkiem surowicy podkreślają dynamiczną naturę tych komórek i ich potencjał w badaniach nad mięśniami szkieletowymi.

Naukowcy wykorzystują podłoża takie jak hydrożele żelatynowe do hodowli komórek C2C12, aby symulować warunki mięśniowe in vivo, umożliwiając szczegółowe badania rozwoju komórek mięśniowych i wpływu macierzy zewnątrzkomórkowej. Profilowanie metaboliczne ujawnia kluczowe informacje na temat szlaków zaangażowanych w tworzenie i regenerację mięśni, koncentrując się na niezbędnych białkach i roli wapnia w skurczu. Techniki wyciszania genów dodatkowo oświetlają proces różnicowania, podkreślając znaczenie fosforylacji SMAD1 w regeneracji mięśni, co ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia regeneracji w przypadku zaniku mięśni i urazów.

Podsumowując, linia komórkowa C2C12 służy jako krytyczne narzędzie w dziedzinie badań biomedycznych, oferując wszechstronną platformę do badania zawiłości tworzenia mięśni, różnicowania, ekspresji genów i głębokiego wpływu różnych czynników na linię komórek mięśni szkieletowych, w tym kluczową rolę miofilamentów, białek filamentów pośrednich i ogólnego kontekstu organizmalnego, w którym rozwijają się te procesy komórkowe.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym