Gå direkte til indholdet
C2C12
Væv
Muskler
Synonymer
C2c12, C2-C12, C12

Dokumenter

C2C12

Cell line · Varenummer 400476

The C2C12 cell line, an immortalized mouse myoblast cell line derived from the thigh muscle of a 2-month-old mouse of the C3H mouse strain, is extensively...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

C2C12-cellelinjen, en udødeliggjort musemyoblastcellelinje, der stammer fra lårmusklen hos en 2 måneder gammel mus af C3H-musestammen, bruges i vid udstrækning i biomedicinsk forskning på grund af dens unikke celledifferentieringsegenskaber. C2C12-myoblastceller spreder sig hurtigt og udviser typiske myoblastkarakteristika under forhold med højt serumindhold. Når de skifter til forhold med lavt serumindhold eller sult, begynder C2C12-cellerne en myogen differentiering og overgår til myotuber, som er forstadier til kontraktile skeletmuskelceller.

C2C12-celler inkorporerer let eksogent cDNA og nukleinsyrer gennem transfektion, hvilket gør dem til et godt valg til genekspressionsstudier og undersøgelser af myoblasters og myotubes differentiering. Differentieringsprocessen er præget af udtrykket af myogene markører som Myf5, MyoD, Myogenin og Mrf4 sammen med muskelspecifikke markører som Csrp3 og Mef2a, som er vigtige i studiet af forskellige muskelfænotyper og regenerering af skeletmuskler.

C2C12-myoblasternes unikke form og deres omdannelse til myoblastcelleringe og efterfølgende til modne myotuber i serum-supplerede medier understreger disse cellers dynamiske natur og deres potentiale inden for skeletmuskelforskning.

Forskere bruger substrater som gelatine-hydrogeler til C2C12-cellekulturer for at simulere in vivo-muskelforhold, hvilket muliggør detaljerede undersøgelser af muskelcelleudvikling og ekstracellulære matrixeffekter. Metabolisk profilering afslører vigtig indsigt i de veje, der er involveret i muskeldannelse og restitution, med fokus på essentielle proteiner og calciums rolle i sammentrækningen. Gensløringsteknikker belyser yderligere differentieringsprocessen og fremhæver betydningen af SMAD1-fosforylering i muskelregenerering, hvilket er afgørende for at forstå genopbygning ved muskelsvind og skader.

Sammenfattende fungerer C2C12-cellelinjen som et kritisk værktøj inden for biomedicinsk forskning og tilbyder en alsidig platform til at udforske vanskelighederne ved muskeldannelse, differentiering, genekspression og den dybe indvirkning af forskellige faktorer på skeletmuskelcellelinjen, herunder den centrale rolle for myofilamenter, intermediære filamentproteiner og den overordnede organismiske kontekst, hvor disse cellulære processer udfolder sig.

Væv
Muskler
Anvendelser
Vært for transfektion
Synonymer
  • C2c12
  • C2-C12
  • C12

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Myoblast-lignende
Celletype
Myoblast
Fordoblingstid
24 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
C2C12 (Cytion katalognummer 400476)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0188

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil danne et sammenhængende lag på ca. 4 dage.
Væskeudskiftning
Hver 3. til 5. dag
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
C3H
Donorens alder
2 måneder