C2C12

C2C12-solulinjaa, joka on C3H-hiirikannan 2 kuukauden ikäisen hiiren reisilihaksesta peräisin oleva kuolematon hiiren myoblastisolulinja, hyödynnetään laajasti biolääketieteellisessä tutkimuksessa sen ainutlaatuisten solujen erilaistumisominaisuuksien vuoksi. C2C12-myoblastisolut lisääntyvät nopeasti ja niillä on tyypilliset myoblastien ominaisuudet korkeassa seerumipitoisuudessa. Siirryttäessä matalan seerumin olosuhteisiin tai nälkäkuolemaan C2C12-solut aloittavat myogeenisen erilaistumisen ja muuttuvat myotubeiksi, jotka ovat supistumiskykyisten luurankolihassolujen esiasteita.

C2C12-solut omaksuvat helposti eksogeenista cDNA:ta ja nukleiinihappoja transfektion avulla, joten ne ovat hyvä valinta geeniekspressiotutkimuksiin ja myoblastien ja myotubien erilaistumista koskeviin tutkimuksiin. Erilaistumisprosessi näkyy myogeenisten merkkiaineiden, kuten Myf5:n, MyoD:n, Myogeninin ja Mrf4:n, ilmentymisenä sekä lihasspesifisten merkkiaineiden, kuten Csrp3:n ja Mef2a:n, ilmentymisenä, jotka ovat välttämättömiä tutkittaessa erilaisia lihasfenotyyppejä ja luustolihaksen uudistumista.

C2C12-myoblastien ainutlaatuinen muoto ja niiden muuttuminen myoblastisolurenkaiksi ja myöhemmin kypsiksi myotubeiksi seerumilla täydennetyssä väliaineessa korostavat näiden solujen dynaamista luonnetta ja niiden potentiaalia luurankolihaksen tutkimuksessa.

Tutkijat käyttävät C2C12-soluviljelmissä substraatteja, kuten gelatiinihydrogeelejä, simuloidakseen in vivo -lihasolosuhteita, mikä mahdollistaa lihassolujen kehityksen ja solunulkoisen matriisin vaikutusten yksityiskohtaisen tutkimisen. Metabolinen profilointi paljastaa keskeisiä näkemyksiä lihaksen muodostumiseen ja palautumiseen liittyvistä reiteistä keskittyen olennaisiin proteiineihin ja kalsiumin rooliin supistumisessa. Geenien hiljentämistekniikat valaisevat edelleen erilaistumisprosessia ja korostavat SMAD1-fosforylaation merkitystä lihaksen uudistumisessa, mikä on ratkaisevan tärkeää, kun halutaan ymmärtää palautumista lihaksen rappeutumisen ja vammojen yhteydessä.

Yhteenvetona voidaan todeta, että C2C12-solulinja toimii kriittisenä välineenä biolääketieteellisessä tutkimuksessa, sillä se tarjoaa monipuolisen alustan lihaksen muodostumisen, erilaistumisen, geeniekspression ja eri tekijöiden syvällisen vaikutuksen luurankolihassolulinjaan, mukaan lukien myofilamenttien ja välifilamenttiproteiinien keskeinen rooli sekä yleinen organismin konteksti, jossa nämä soluprosessit kehittyvät.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa