Ga naar de inhoud
C2C12
Weefsel
Spier
Synoniemen
C2c12, C2-C12, C12

Documenten

C2C12

Cell line · Productnummer 400476

The C2C12 cell line, an immortalized mouse myoblast cell line derived from the thigh muscle of a 2-month-old mouse of the C3H mouse strain, is extensively...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De C2C12 cellijn, een geïmmortaliseerde myoblastcellijn afkomstig uit de dijspier van een 2-maanden oude muis van de C3H muizenstam, wordt veel gebruikt in biomedisch onderzoek vanwege zijn unieke celdifferentiatie-eigenschappen. C2C12 myoblastcellen prolifereren snel en vertonen typische myoblastkenmerken onder omstandigheden met veel serum. Bij overgang naar een laag serumgehalte of verhongering beginnen C2C12 cellen met myogene differentiatie, waarbij ze overgaan in myotubes, voorlopers van contractiele skeletspiercellen.

C2C12 cellen nemen exogeen cDNA en nucleïnezuren gemakkelijk op via transfectie, waardoor ze een goede keuze zijn voor genexpressiestudies en onderzoeken naar de differentiatie van myoblasten en myotubes. Het differentiatieproces wordt gekenmerkt door de expressie van myogene markers zoals Myf5, MyoD, Myogenine en Mrf4, naast spierspecifieke markers zoals Csrp3 en Mef2a, die essentieel zijn voor het bestuderen van verschillende spierfenotypen en de regeneratie van skeletspieren.

De unieke vorm van C2C12 myoblasten en hun transformatie in myoblastcelringen en vervolgens in volwassen myobuizen in media met serum onderstreept de dynamische aard van deze cellen en hun potentieel in onderzoek naar skeletspieren.

Onderzoekers gebruiken substraten zoals gelatinehydrogels voor C2C12 celkweken om in vivo spieromstandigheden te simuleren, waardoor gedetailleerde studies van spiercelontwikkeling en extracellulaire matrixeffecten mogelijk worden. Metabole profilering onthult belangrijke inzichten in de routes die betrokken zijn bij spiervorming en herstel, waarbij de nadruk ligt op essentiële eiwitten en de rol van calcium bij contractie. Technieken voor het uitschakelen van genen verhelderen het differentiatieproces en benadrukken het belang van SMAD1-fosforylering in spierregeneratie, wat cruciaal is voor het begrijpen van herstel bij spieratrofie en letsel.

Samenvattend kan gesteld worden dat de C2C12 cellijn een cruciaal instrument is voor biomedisch onderzoek. Het biedt een veelzijdig platform voor het onderzoeken van de fijne kneepjes van spiervorming, differentiatie, genexpressie en de diepgaande invloed van verschillende factoren op het skeletspiercelstelsel, inclusief de centrale rol van myofilamenten, tussenliggende filamentproteïnen en de algemene organismale context waarin deze cellulaire processen zich ontvouwen.

Weefsel
Spier
Toepassingen
Transfectiegastheer
Synoniemen
  • C2c12
  • C2-C12
  • C12

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Myoblast-achtige
Celtype
Myoblasten
Verdubbelingstijd
24 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
C2C12 (Cytion catalogusnummer 400476)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0188

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 zal in ongeveer 4 dagen een confluente laag opleveren.
Vloeistofverversing
Om de 3 tot 5 dagen
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
C3H
Leeftijd van de donor
2 maanden