Перейти до вмісту
C2C12
Тканина
М'яз
Синоніми
C2c12, C2-C12, C12

Документи

C2C12

Cell line · Номер товару 400476

The C2C12 cell line, an immortalized mouse myoblast cell line derived from the thigh muscle of a 2-month-old mouse of the C3H mouse strain, is extensively...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія C2C12, іморталізована лінія міобластів миші, отримана зі стегнового м'яза 2-місячної миші штаму C3H, широко використовується в біомедичних дослідженнях завдяки своїм унікальним властивостям клітинної диференціації. Клітини міобластів C2C12 швидко проліферують і демонструють типові характеристики міобластів в умовах високого вмісту сироватки. При переході до умов з низьким вмістом сироватки або голодування клітини C2C12 ініціюють міогенну диференціацію, перетворюючись на міотрубки, які є попередниками скоротливих клітин скелетних м'язів.

Клітини C2C12 легко включають екзогенну кДНК і нуклеїнові кислоти шляхом трансфекції, що робить їх вдалим вибором для вивчення експресії генів і дослідження диференціювання міобластів і міотрубочок. Процес диференціювання характеризується експресією міогенних маркерів, таких як Myf5, MyoD, Myogenin та Mrf4, а також м'язово-специфічних маркерів, таких як Csrp3 та Mef2a, які є важливими для вивчення різних фенотипів м'язів та регенерації скелетних м'язів.

Унікальна форма міобластів C2C12 та їх трансформація в міобластні клітинні кільця, а згодом у зрілі міотрубки в середовищах з додаванням сироватки підкреслюють динамічну природу цих клітин та їх потенціал у дослідженні скелетних м'язів.

Дослідники використовують такі субстрати, як желатинові гідрогелі для культур клітин C2C12, щоб імітувати стан м'язів in vivo, що дозволяє детально вивчати розвиток м'язових клітин і вплив позаклітинного матриксу. Метаболічне профілювання дає ключові відомості про шляхи, що беруть участь у формуванні та відновленні м'язів, зосереджуючись на основних білках та ролі кальцію у скороченні. Методи приглушення генів додатково висвітлюють процес диференціювання, підкреслюючи значення фосфорилювання SMAD1 у регенерації м'язів, що має вирішальне значення для розуміння відновлення при виснаженні та травмах м'язів.

Таким чином, клітинна лінія C2C12 слугує важливим інструментом у сфері біомедичних досліджень, пропонуючи універсальну платформу для вивчення тонкощів формування м'язів, диференціації, експресії генів та глибокого впливу різних факторів на клітинну лінію скелетних м'язів, включаючи ключову роль міофіламентів, проміжних білків філаментів та загального організмового контексту, в якому розгортаються ці клітинні процеси.

Тканина
М'яз
Застосування
Хазяїн для трансфекції
Синоніми
  • C2c12
  • C2-C12
  • C12

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Міобластоподібні
Тип клітини
Міобласт
Час подвоєння
24 години

04Ідентифікатори

Посилання
C2C12 (номер за каталогом Cytion 400476)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_0188

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 x 104 клітин/см2 дасть злитий шар приблизно за 4 дні
Оновлення рідини
Кожні 3-5 днів
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Порода / підвид
C3H
Вік донора
2 місяці