C2C12

C2C12-cellinjen, en immortaliserad myoblastcellinje från mus som härrör från lårmuskeln hos en 2 månader gammal mus av C3H-stammen, används flitigt inom biomedicinsk forskning på grund av sina unika celldifferentieringsegenskaper. C2C12 myoblastceller sprider sig snabbt och uppvisar typiska myoblastegenskaper under förhållanden med hög serumhalt. Vid övergång till förhållanden med låg serumhalt eller svält påbörjar C2C12-cellerna myogen differentiering och övergår till myotuber, som är föregångare till kontraktila skelettmuskelceller.

C2C12-cellerna tar lätt upp exogent cDNA och nukleinsyror genom transfektion, vilket gör dem till ett bra val för genuttrycksstudier och undersökningar av myoblasters och myotubers differentiering. Differentieringsprocessen kännetecknas av uttryck av myogena markörer som Myf5, MyoD, Myogenin och Mrf4, tillsammans med muskelspecifika markörer som Csrp3 och Mef2a, som är viktiga för att studera olika muskelfenotyper och regenerering av skelettmuskler.

Den unika formen hos C2C12-myoblaster och deras omvandling till myoblastcellringar och därefter till mogna myotuber i serumkompletterade medier understryker dessa cellers dynamiska natur och deras potential inom skelettmuskelforskning.

Forskare använder substrat som gelatinhydrogeler för C2C12-cellkulturer för att simulera in vivo-muskelförhållanden, vilket möjliggör detaljerade studier av muskelcellsutveckling och effekter av extracellulär matris. Metabolisk profilering ger viktiga insikter om de vägar som är involverade i muskelbildning och återhämtning, med fokus på viktiga proteiner och kalciumets roll vid sammandragning. Tekniker för genavstängning belyser differentieringsprocessen ytterligare och framhäver betydelsen av SMAD1-fosforylering vid muskelregenerering, vilket är avgörande för att förstå återhämtning vid muskelförtvining och muskelskada.

Sammanfattningsvis fungerar C2C12-cellinjen som ett viktigt verktyg inom biomedicinsk forskning och erbjuder en mångsidig plattform för att utforska svårigheterna med muskelbildning, differentiering, genuttryck och den djupgående inverkan av olika faktorer på skelettmuskelcellinjen, inklusive den centrala rollen för myofilament, intermediära filamentproteiner och det övergripande organismiska sammanhang där dessa cellulära processer utvecklas.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring