C2C12

La linea cellulare C2C12, un mioblasto immortale di topo derivato dal muscolo della coscia di un topo di 2 mesi del ceppo C3H, è ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica per le sue proprietà uniche di differenziazione cellulare. Le cellule mioblastiche C2C12 proliferano rapidamente e presentano le caratteristiche tipiche dei mioblasti in condizioni di alto contenuto di siero. Quando passano a condizioni di basso contenuto di siero o di fame, le cellule C2C12 iniziano la differenziazione miogenica, trasformandosi in miotubi, precursori delle cellule muscolari scheletriche contrattili.

Le cellule C2C12 incorporano facilmente cDNA e acidi nucleici esogeni attraverso la trasfezione, il che le rende una buona scelta per gli studi di espressione genica e per le indagini sul differenziamento di mioblasti e miotubi. Il processo di differenziazione è caratterizzato dall'espressione di marcatori miogenici come Myf5, MyoD, Miogenina e Mrf4, oltre a marcatori muscolo-specifici come Csrp3 e Mef2a, essenziali nello studio di diversi fenotipi muscolari e della rigenerazione del muscolo scheletrico.

La forma unica dei mioblasti C2C12 e la loro trasformazione in anelli di cellule mioblastiche e successivamente in miotubi maturi in mezzi di coltura addizionati di siero sottolineano la natura dinamica di queste cellule e il loro potenziale nella ricerca sul muscolo scheletrico.

I ricercatori utilizzano substrati come gli idrogel di gelatina per le colture di cellule C2C12 per simulare le condizioni del muscolo in vivo, consentendo studi dettagliati sullo sviluppo delle cellule muscolari e sugli effetti della matrice extracellulare. La profilazione metabolica rivela intuizioni chiave sui percorsi coinvolti nella formazione e nel recupero del muscolo, concentrandosi sulle proteine essenziali e sul ruolo del calcio nella contrazione. Le tecniche di silenziamento genico illuminano ulteriormente il processo di differenziazione, evidenziando l'importanza della fosforilazione di SMAD1 nella rigenerazione muscolare, cruciale per comprendere il recupero nel deperimento e nelle lesioni muscolari.

In sintesi, la linea cellulare C2C12 è uno strumento fondamentale nel campo della ricerca biomedica, in quanto offre una piattaforma versatile per esplorare le complessità della formazione e del differenziamento del muscolo, l'espressione genica e il profondo impatto di vari fattori sul lignaggio delle cellule del muscolo scheletrico, compreso il ruolo centrale dei miofilamenti, delle proteine dei filamenti intermedi e del contesto generale dell'organismo in cui si svolgono questi processi cellulari.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia