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Tessuto
Muscolo scheletrico
Sinonimi
L-6, L-6 myoblast

Documenti

L6

Cell line · Codice prodotto 305231

€550.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare L6 è un modello consolidato derivato dal tessuto muscolare scheletrico di ratto. Queste cellule si distinguono per la loro capacità di differenziarsi in miotubi, il che le rende uno strumento prezioso per lo studio dello sviluppo, della rigenerazione e della fisiologia muscolare. Le cellule L6 presentano una forte capacità proliferativa e sono comunemente utilizzate nella ricerca sulla biologia delle cellule muscolari, compresi gli studi sulla sintesi proteica, l'ipertrofia e l'atrofia del muscolo. Il processo di differenziazione delle cellule L6 può essere indotto in specifiche condizioni di coltura, portando alla formazione di miotubi multinucleati che imitano da vicino le caratteristiche delle fibre muscolari scheletriche mature.

Oltre alle applicazioni nella ricerca sulla fisiologia muscolare, le cellule L6 sono impiegate anche in studi metabolici, in particolare quelli che riguardano l'assorbimento del glucosio e le vie di segnalazione dell'insulina. Queste cellule esprimono recettori per l'insulina e possono essere utilizzate per studiare i meccanismi molecolari alla base dell'insulino-resistenza e del diabete. La reattività della linea cellulare L6 a vari stimoli metabolici la rende un modello ideale per esplorare gli effetti di diversi trattamenti o modifiche genetiche sul metabolismo muscolare. Nel complesso, le cellule L6 rappresentano una piattaforma versatile e affidabile per progredire nella comprensione della biologia muscolare e delle malattie metaboliche.

Tessuto
Muscolo scheletrico
Sinonimi
  • L-6
  • L-6 myoblast

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tipo di cellula
Mioblasto

04Identificatori

Riferimento bibliografico
L6 (numero di catalogo Cytion 305231)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0385

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Miosina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
1 giorno