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Gewebe
Skelettmuskel
Synonyme
L-6, L-6 myoblast

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L6

Cell line · Artikelnummer 305231

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die L6-Zelllinie ist ein gut etabliertes Modell, das aus dem Skelettmuskelgewebe der Ratte gewonnen wird. Diese Zellen zeichnen sich durch ihre Fähigkeit aus, sich in Myotubes zu differenzieren, was sie zu einem wertvollen Instrument für die Untersuchung von Muskelentwicklung, Regeneration und Physiologie macht. L6-Zellen weisen eine robuste Proliferationsfähigkeit auf und werden häufig in der Forschung zur Muskelzellbiologie verwendet, einschließlich Studien zur Muskelproteinsynthese, Hypertrophie und Atrophie. Der Differenzierungsprozess in L6-Zellen kann unter bestimmten Kulturbedingungen ausgelöst werden, was zur Bildung von mehrkernigen Myotubes führt, die die Eigenschaften reifer Skelettmuskelfasern sehr gut nachahmen.

Neben ihrer Anwendung in der muskelphysiologischen Forschung werden L6-Zellen auch in Stoffwechselstudien eingesetzt, insbesondere in Studien zur Glukoseaufnahme und zu Insulinsignalwegen. Diese Zellen exprimieren Insulinrezeptoren und können zur Untersuchung der molekularen Mechanismen verwendet werden, die Insulinresistenz und Diabetes zugrunde liegen. Die Reaktionsfähigkeit der L6-Zelllinie auf verschiedene Stoffwechselreize macht sie zu einem idealen Modell für die Erforschung der Auswirkungen verschiedener Behandlungen oder genetischer Veränderungen auf den Muskelstoffwechsel. Insgesamt stellen die L6-Zellen eine vielseitige und zuverlässige Plattform dar, um unser Verständnis der Muskelbiologie und von Stoffwechselkrankheiten zu verbessern.

Gewebe
Skelettmuskel
Synonyme
  • L-6
  • L-6 myoblast

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Myoblasten

04Bezeichner

Quellenangabe
L6 (Cytion Katalognummer 305231)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_0385

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Myosin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
1 Tag