Mine otse sisu juurde
Kude
Skeletilihas
Sünonüümid
L-6, L-6 myoblast

Dokumendid

L6

Cell line · Toote number 305231

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

L6 rakuliin on hästi tõestatud mudel, mis on saadud roti skeletilihaskoest. Neid rakke iseloomustab nende võime diferentseeruda müotuubideks, mis teeb neist väärtusliku vahendi lihaste arengu, regenereerimise ja füsioloogia uurimiseks. L6 rakkudel on tugev proliferatsioonivõime ja neid kasutatakse tavaliselt lihasrakkude bioloogiat käsitlevates uuringutes, sealhulgas lihasvalkude sünteesi, hüpertroofia ja atroofia uuringutes. L6 rakkude diferentseerumisprotsessi on võimalik indutseerida spetsiifilistes kasvatustingimustes, mille tulemusel moodustuvad mitmetuumalised müotuubid, mis jäljendavad lähedalt küpsete skeletilihaskiudude omadusi.

Lisaks nende kasutamisele lihasfüsioloogilistes uuringutes kasutatakse L6 rakke ka ainevahetuse uuringutes, eriti sellistes, mis on seotud glükoosi omastamise ja insuliini signaaliradadega. Need rakud ekspresseerivad insuliini retseptoreid ja neid saab kasutada insuliiniresistentsuse ja diabeedi aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. L6 rakuliini tundlikkus erinevatele ainevahetuse stiimulitele muudab selle ideaalseks mudeliks erinevate ravimeetodite või geneetiliste modifikatsioonide mõju uurimiseks lihaste ainevahetusele. Kokkuvõttes on L6 rakud mitmekülgne ja usaldusväärne platvorm lihaste bioloogia ja ainevahetushaiguste paremaks mõistmiseks.

Kude
Skeletilihas
Sünonüümid
  • L-6
  • L-6 myoblast

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Myoblast

04Tunnused

Viide
L6 (Cytioni katalooginumber 305231)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0385

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Müosiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
1 päev