Mine otse sisu juurde
H9c2(2-1)
Kude
Süda, südamelihas
Sünonüümid
H9c2 (2-1), H9c2, H9C2

Dokumendid

H9c2(2-1)

Cell line · Toote number 305203

H9c2(2-1) cells, derived from the ventricular myoblasts of embryonic BD1X rat hearts, are a subclone of the original H9 cell line established in the early...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

H9c2(2-1) rakud, mis on saadud embrüonaalsete BD1X rottide südame ventrikulaarsetest müoblastidest, on 1990ndate alguses loodud algse H9 rakuliini alamkloon. Need rakud on immortaliseeritud müoblastid, mida tavaliselt kasutatakse in vitro südame ainevahetuse, füsioloogia ja patofüsioloogia, sealhulgas müokardi isheemia, hüpertroofia ja apoptoosimehhanismide uurimiseks.

Fenotüübiliselt on H9c2 rakud skeletilihase omadustega, kuid säilitavad võime võtta vastu südamelihase fenotüübi spetsiifilistes eksperimentaalsetes tingimustes, näiteks retinoiinhappe või muude ainetega indutseeritud diferentseerumise korral. Selline paindlikkus muudab nad väärtuslikuks mudeliks südamelihase käitumise uurimiseks vastuseks erinevatele füsioloogilistele ja farmakoloogilistele stiimulitele. Geneetiliselt on H9c2 rakud diploidsed, mis hõlbustab nende kasutamist geneetilistes uuringutes, kus stabiilse karüotüübi säilitamine on oluline.

H9c2(2-1)-rakkude kasutamine on aidanud oluliselt kaasa rakkude vastuste mõistmisele oksüdatiivsele stressile, mitokondriaalse düsfunktsiooni ja erinevate farmakoloogiliste ainete kaitsva rolli mõistmisele kardiotoksilisuse vastu. See rakuliin on endiselt kardiomüotsüütidega seotud uuringute nurgakivi, pakkudes korratavat ja kontrollitud mudelit, mille abil saab selgitada südame funktsiooni ja haiguste aluseks olevaid keerulisi bioloogilisi ja molekulaarseid mehhanisme.

Kude
Süda, südamelihas
Sünonüümid
  • H9c2 (2-1)
  • H9c2
  • H9C2

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Myoblast

04Tunnused

Viide
H9c2(2-1) (Cytioni katalooginumber 305203)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0286

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Atsetüülkoliin, väljendatud
Valgu ekspressioon
Müokinaas, kreatiinfosfokinaas, müosiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BDIx
Doonori vanus
Embrüo