Siirry sisältöön
H9c2(2-1)
Kudos
Sydän, sydänlihas
Synonyymit
H9c2 (2-1), H9c2, H9C2

Asiakirjat

H9c2(2-1)

Cell line · Tuotenumero 305203

H9c2(2-1) cells, derived from the ventricular myoblasts of embryonic BD1X rat hearts, are a subclone of the original H9 cell line established in the early...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

H9c2(2-1)-solut, jotka on saatu alkion BD1X-rottien sydämen kammiomyoblasteista, ovat 1990-luvun alussa perustetun alkuperäisen H9-solulinjan alaklooni. Nämä solut ovat kuolemattomia myoblasteja, joita käytetään yleisesti in vitro sydämen aineenvaihdunnan, fysiologian ja patofysiologian tutkimiseen, mukaan lukien sydänlihaksen iskemia, hypertrofia ja apoptoosimekanismit.

Fenotyyppisesti H9c2-soluilla on luurankolihaksen ominaisuuksia, mutta niillä on kyky omaksua sydänlihaksen fenotyyppi tietyissä kokeellisissa olosuhteissa, kuten retinoiinihapon tai muiden aineiden aiheuttama erilaistuminen. Tämä joustavuus tekee niistä arvokkaan mallin sydänlihaksen käyttäytymisen tutkimiseen vasteena erilaisiin fysiologisiin ja farmakologisiin ärsykkeisiin. Geneettisesti H9c2-solut ovat diploideja, mikä helpottaa niiden käyttöä geneettisissä tutkimuksissa, joissa vakaan karyotyypin säilyttäminen on ratkaisevan tärkeää.

H9c2(2-1)-soluja käyttävä tutkimus on auttanut merkittävästi ymmärtämään solujen vasteita oksidatiiviseen stressiin, mitokondrioiden toimintahäiriöitä ja erilaisten farmakologisten aineiden suojaavaa vaikutusta sydäntoksisuudelta. Tämä solulinja on edelleen sydänlihassoluihin liittyvän tutkimuksen kulmakivi, sillä se tarjoaa toistettavissa olevan, kontrolloidun mallin sydämen toiminnan ja sairauksien taustalla olevien monimutkaisten biologisten ja molekulaaristen mekanismien selvittämiseksi.

Kudos
Sydän, sydänlihas
Synonyymit
  • H9c2 (2-1)
  • H9c2
  • H9C2

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Myoblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
H9c2(2-1) (Cytionin luettelonumero 305203)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0286

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Asetyylikoliini, ilmaistuna
Proteiinin ilmentyminen
Myokinaasi, kreatiinifosfokinaasi, myosiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BDIx
Luovuttajan ikä
Alkio