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H9c2(2-1)
Tissu
Cœur, myocarde
Synonymes
H9c2 (2-1), H9c2, H9C2

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H9c2(2-1)

Cell line · Référence du produit 305203

H9c2(2-1) cells, derived from the ventricular myoblasts of embryonic BD1X rat hearts, are a subclone of the original H9 cell line established in the early...

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1

01Informations générales

Description

Les cellules H9c2(2-1), dérivées des myoblastes ventriculaires de cœurs embryonnaires de rats BD1X, sont un sous-clone de la lignée cellulaire H9 originale établie au début des années 1990. Ces cellules sont des myoblastes immortalisés couramment utilisés in vitro pour étudier le métabolisme, la physiologie et la physiopathologie cardiaques, y compris l'ischémie myocardique, l'hypertrophie et les mécanismes d'apoptose.

Phénotypiquement, les cellules H9c2 présentent les caractéristiques du muscle squelettique mais conservent la capacité d'adopter un phénotype de muscle cardiaque dans des conditions expérimentales spécifiques, telles que la différenciation induite par l'acide rétinoïque ou d'autres agents. Cette flexibilité en fait un modèle précieux pour étudier le comportement du muscle cardiaque en réponse à divers stimuli physiologiques et pharmacologiques. D'un point de vue génétique, les cellules H9c2 sont diploïdes, ce qui facilite leur utilisation dans les études génétiques, où le maintien d'un caryotype stable est crucial.

La recherche sur les cellules H9c2(2-1) a contribué de manière significative à la compréhension des réponses cellulaires au stress oxydatif, au dysfonctionnement mitochondrial et aux rôles protecteurs de divers agents pharmacologiques contre la cardiotoxicité. Cette lignée cellulaire reste une pierre angulaire de la recherche sur les cardiomyocytes, car elle offre un modèle reproductible et contrôlé permettant d'élucider les mécanismes biologiques et moléculaires complexes qui sous-tendent la fonction et les maladies cardiaques.

Tissu
Cœur, myocarde
Synonymes
  • H9c2 (2-1)
  • H9c2
  • H9C2

02Classification

Organisme
Rat
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Myoblaste

04Identifiants

Référence
H9c2(2-1) (numéro de catalogue de Cytion 305203)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0286

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Acétylcholine, exprimée
Expression des protéines
Myokinase, Créatine Phosphokinase, Myosine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
BDIx
Âge du donneur
Embryon