Pāriet uz saturu
H9c2(2-1)
Audums
Sirds, miokards
Sinonīmi
H9c2 (2-1), H9c2, H9C2

Dokumenti

H9c2(2-1)

Cell line · Preces numurs 305203

H9c2(2-1) cells, derived from the ventricular myoblasts of embryonic BD1X rat hearts, are a subclone of the original H9 cell line established in the early...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

H9c2(2-1) šūnas, kas iegūtas no žurku BD1X embrionālo sirsniņu kambaru mioblastiem, ir sākotnējās H9 šūnu līnijas, kas izveidota 90. gadu sākumā, subklons. Šīs šūnas ir imortalizēti mioblasti, ko parasti izmanto in vitro, lai pētītu sirds metabolismu, fizioloģiju un patofizioloģiju, tostarp miokarda išēmiju, hipertrofiju un apoptozes mehānismus.

Fenotipiski H9c2 šūnām piemīt skeleta muskuļu īpašības, bet tās saglabā spēju pieņemt sirds muskuļa fenotipu īpašos eksperimentālos apstākļos, piemēram, ar retinoīnskābi vai citiem līdzekļiem izraisītā diferenciācijā. Šī elastība padara tās par vērtīgu modeli sirds muskuļa uzvedības izpētei, reaģējot uz dažādiem fizioloģiskiem un farmakoloģiskiem stimuliem. Ģenētiski H9c2 šūnas ir diploīdas, kas atvieglo to izmantošanu ģenētiskajos pētījumos, kur ir svarīgi saglabāt stabilu kariotipu.

Pētījumi, kuros izmantotas H9c2(2-1) šūnas, ir ievērojami veicinājuši izpratni par šūnu reakciju uz oksidatīvo stresu, mitohondriālo disfunkciju un dažādu farmakoloģisko līdzekļu aizsargfunkcijām pret kardiotoksicitāti. Šī šūnu līnija joprojām ir stūrakmens ar kardiomiocītiem saistītos pētījumos, piedāvājot reproducējamu, kontrolējamu modeli, lai noskaidrotu sarežģītus bioloģiskos un molekulāros mehānismus, kas ir sirds funkciju un slimību pamatā.

Audums
Sirds, miokards
Sinonīmi
  • H9c2 (2-1)
  • H9c2
  • H9C2

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Mioblasti

04Identifikatori

Atsauce
H9c2(2-1) (Cytion kataloga numurs 305203)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_0286

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Acetilholīns, izteikts
Proteīnu ekspresija
Miokināze, kreatīnfosfokināze, miozīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BDIx
Donora vecums
Embrijs