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H9c2(2-1)
Tessuto
Cuore, miocardio
Sinonimi
H9c2 (2-1), H9c2, H9C2

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H9c2(2-1)

Cell line · Codice prodotto 305203

H9c2(2-1) cells, derived from the ventricular myoblasts of embryonic BD1X rat hearts, are a subclone of the original H9 cell line established in the early...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule H9c2(2-1), derivate dai mioblasti ventricolari di cuori embrionali di ratto BD1X, sono un sottoclone della linea cellulare originale H9 creata all'inizio degli anni Novanta. Queste cellule sono mioblasti immortalizzati che vengono comunemente utilizzati in vitro per studiare il metabolismo, la fisiologia e la fisiopatologia cardiaca, tra cui l'ischemia miocardica, l'ipertrofia e i meccanismi di apoptosi.

Fenotipicamente, le cellule H9c2 presentano caratteristiche del muscolo scheletrico, ma mantengono la capacità di adottare un fenotipo muscolare cardiaco in condizioni sperimentali specifiche, come il differenziamento indotto dall'acido retinoico o da altri agenti. Questa flessibilità li rende un modello prezioso per studiare il comportamento del muscolo cardiaco in risposta a vari stimoli fisiologici e farmacologici. Dal punto di vista genetico, le cellule H9c2 sono diploidi, il che ne facilita l'uso negli studi genetici, dove il mantenimento di un cariotipo stabile è fondamentale.

La ricerca che impiega le cellule H9c2(2-1) ha contribuito in modo significativo alla comprensione delle risposte cellulari allo stress ossidativo, alla disfunzione mitocondriale e al ruolo protettivo di vari agenti farmacologici contro la cardiotossicità. Questa linea cellulare rimane una pietra miliare nella ricerca sui cardiomiociti, offrendo un modello riproducibile e controllato per chiarire i complessi meccanismi biologici e molecolari alla base della funzione e delle malattie cardiache.

Tessuto
Cuore, miocardio
Sinonimi
  • H9c2 (2-1)
  • H9c2
  • H9C2

02Classificazione

Organismo
Ratto
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Mioblasto

04Identificatori

Riferimento bibliografico
H9c2(2-1) (numero di catalogo Cytion 305203)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0286

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Acetilcolina, espressa
Espressione proteica
Miochinasi, creatina fosfochinasi, miosina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
BDIx
Età dei donatori
Embrione